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xj22667

银虫 (小有名气)

[交流] 求助:重组质粒双酶切验证,电泳检测条带都偏大

最近做一个克隆,用的是PET-28a载体(5369bp),目的片段约300bp,转化后挑斑提质粒,双酶切(BamH 1、Hind 3)后电泳检测条带都偏大(Maker为1kp和Maker1) 中间四个为酶切产物 最后一个为空载体回收作对照  
切了好几次都是这样   为什么啊 郁闷!
是不是克隆又失败了 恳求各位高人指点

[ Last edited by xj22667 on 2009-7-30 at 17:10 ]
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xj22667

银虫 (小有名气)

途中在400那里隐约有条较淡的带  我用的胶是1%的  质粒是拿酚氯仿提的
5楼2009-07-30 18:27:37
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xj22667

银虫 (小有名气)

感谢大家的分析 很有道理的 我再提质粒检测一次 3Q
10楼2009-07-31 10:56:14
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