24小时热门版块排行榜    

查看: 1467  |  回复: 4
【悬赏金币】回答本帖问题,作者454278916将赠送您 10 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

454278916

铜虫 (初入文坛)

[求助] 未纯化PCR能直接转化测序么

200bp左右序列,单条带,很亮,连接转化后蓝白筛选,白斑篮斑都有,挑选了10个左右白斑测序,测序结果都是空的,是不是这样做转不进去呢
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

引用回帖:
3楼: Originally posted by 454278916 at 2021-02-26 17:09:52
emm...差不多吧,就是从PCR仪拿出来直接去做连接转化了,没用试剂盒纯化或者切胶回收...

一般来说是做不出来的。不过这都不碍事儿,一天的工夫自己重新做一遍就好了
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2021-02-27 09:57:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

楼主的问题听不懂。是说PCR产物没纯化除去PCR的缓冲液,就直接用T4连接酶和相应的缓冲液做连接吗?
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2021-02-26 13:25:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

454278916

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-02-26 13:25:21
楼主的问题听不懂。是说PCR产物没纯化除去PCR的缓冲液,就直接用T4连接酶和相应的缓冲液做连接吗?

emm...差不多吧,就是从PCR仪拿出来直接去做连接转化了,没用试剂盒纯化或者切胶回收
3楼2021-02-26 17:09:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

454278916

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-02-27 09:57:52
一般来说是做不出来的。不过这都不碍事儿,一天的工夫自己重新做一遍就好了...

好的好的
5楼2021-02-27 13:06:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-12 7/350 2026-03-12 20:31 by peike
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +6 mysdl 2026-03-11 8/400 2026-03-12 17:19 by 松花缸1201
[考研] 材料301分求调剂 +4 Liyouyumairs 2026-03-12 4/200 2026-03-12 15:46 by peike
[考研] 一志愿中科大材料与化工。353分能调剂到哪? +5 MayUxw1 2026-03-08 10/500 2026-03-12 15:46 by EBSD
[考研] 0856材料与化工309分求调剂 +5 ZyZy…… 2026-03-10 5/250 2026-03-12 11:31 by 2020015
[考研] 274求调剂0856材料化工 +9 z2839474511 2026-03-11 10/500 2026-03-11 23:46 by BruceLiu320
[考研] 0856化工原理 +5 z2839474511 2026-03-10 5/250 2026-03-11 19:46 by peike
[考研] 0857环境调剂 +5 熠熠_11 2026-03-10 5/250 2026-03-11 10:59 by wang_dand
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[考研] 0856材料与化工353分求调剂 +11 NIFFFfff 2026-03-09 11/550 2026-03-10 18:36 by suyuanhai
[考研] 收调剂 +7 调剂的考研学生 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:57 by 麦茶汤圆
[考研] 一志愿:武汉理工,材料工程,英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
[考研] 材料调剂 +4 xxxcm 2026-03-08 7/350 2026-03-09 10:11 by EBSD
[考研] 0856材料与化工290求调剂 +7 Nebulala 2026-03-08 8/400 2026-03-09 05:25 by houyaoxu
[考研] 083000环境科学与工程调剂 +5 加油呀fxy 2026-03-07 6/300 2026-03-08 21:07 by sdgdsdgd
[考研] 安徽农业大学材料与化学学院0856材料招收调剂 +3 akakk47 2026-03-05 9/450 2026-03-08 21:03 by deng.z.1314
[考研] 269求调剂 +3 朔朔话 2026-03-08 4/200 2026-03-08 20:39 by 热情沙漠
[考研] 求调剂,一志愿华中科大0702,数一英一,293 +4 小罗露一二 2026-03-07 4/200 2026-03-08 16:36 by 星空星月
[考研] 085701环境工程317分求调剂 +9 6汆尼9 2026-03-07 9/450 2026-03-08 06:41 by 刘兵
[考研] 材料科学(0805)338 求调剂 +7 xiaokang3286 2026-03-07 7/350 2026-03-08 03:42 by lfhuang
信息提示
请填处理意见