应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 未纯化PCR能直接转化测序么
51/1返回列表
查看: 1460  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者454278916将赠送您 10 个金币

454278916

铜虫 (初入文坛)

[求助] 未纯化PCR能直接转化测序么

200bp左右序列，单条带，很亮，连接转化后蓝白筛选，白斑篮斑都有，挑选了10个左右白斑测序，测序结果都是空的，是不是这样做转不进去呢
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-02-26 10:30:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
楼主的问题听不懂。是说PCR产物没纯化除去PCR的缓冲液，就直接用T4连接酶和相应的缓冲液做连接吗？
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2021-02-26 13:25:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

454278916

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-02-26 13:25:21
楼主的问题听不懂。是说PCR产物没纯化除去PCR的缓冲液，就直接用T4连接酶和相应的缓冲液做连接吗？

emm...差不多吧，就是从PCR仪拿出来直接去做连接转化了，没用试剂盒纯化或者切胶回收
赞一下 回复此楼
3楼2021-02-26 17:09:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
引用回帖:
3楼: Originally posted by 454278916 at 2021-02-26 17:09:52
emm...差不多吧，就是从PCR仪拿出来直接去做连接转化了，没用试剂盒纯化或者切胶回收...

一般来说是做不出来的。不过这都不碍事儿，一天的工夫自己重新做一遍就好了
赞一下(1人) 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2021-02-27 09:57:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

454278916

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-02-27 09:57:52
一般来说是做不出来的。不过这都不碍事儿，一天的工夫自己重新做一遍就好了...

好的好的
回复此楼
5楼2021-02-27 13:06:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 454278916 的主题更新
51/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 伙伴们，祝我生日快乐吧 +3 myrtle 2026-03-10 4/200 2026-03-11 17:49 by myrtle
[考研] 一志愿安徽大学材料工程专硕313分，求调剂的学校 +7 Yu先生 2026-03-10 9/450 2026-03-11 16:46 by 2020015
[考研] 311求调剂 +6 zchqwer 2026-03-10 6/300 2026-03-11 15:54 by 30660438
[考研] 材料371求调剂 +7 鳄鱼? 2026-03-11 9/450 2026-03-11 10:31 by 木瓜膏
[考研] 标题:捡漏预警|08工科/09农学调剂!英语要求低，过线即有机会! +7 马超放烟花 2026-03-07 12/600 2026-03-10 23:16 by Equinoxhua
[考研] 化工0817调剂 +8 灿若星晨 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:44 by 星空星月
[考研] 265求调剂 +8 小木虫085600 2026-03-09 11/550 2026-03-10 19:44 by 绿色低碳化学
[考研] 求调剂材料专硕293 +6 段_(:з」∠)_ 2026-03-10 6/300 2026-03-10 18:22 by ms629
[考研] 0856材料与化工309分求调剂 +4 ZyZy…… 2026-03-10 4/200 2026-03-10 15:20 by houyaoxu
[考研] 环境调剂 +5 晓看天暮看云 2026-03-09 5/250 2026-03-10 10:46 by 星空星月
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
[考研] 070300化学求调剂 +5 扑风铃的猫 2026-03-08 10/500 2026-03-09 13:58 by macy2011
[考研] 求0856调剂 +5 小力气珂珂 2026-03-08 5/250 2026-03-09 06:42 by houyaoxu
[考研] 理学287分求调剂 +4 看看我. 2026-03-05 4/200 2026-03-08 22:11 by qingfeng258
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-08 3/150 2026-03-08 19:34 by ms629
[考研] 070300化学求调剂292分 +3 打烊eee 2026-03-07 3/150 2026-03-07 20:04 by houyaoxu
[考研] 第一志愿上海大学，专业化学工程与技术，总分288，求调剂 +3 1829197082 2026-03-07 3/150 2026-03-07 19:14 by houyaoxu
[考研] 316求调剂 +3 林小星发大财 2026-03-05 5/250 2026-03-06 09:05 by Iveryant
[考研] 282求调剂 +7 夕～日 2026-03-05 8/400 2026-03-05 21:31 by zzpnuli111
[考研] 材料调剂 +5 ws 上岸鸭 2026-03-05 5/250 2026-03-05 20:06 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭