应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 未纯化PCR能直接转化测序么
51/1返回列表
查看: 1672  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者454278916将赠送您 10 个金币

454278916

铜虫 (初入文坛)

[求助] 未纯化PCR能直接转化测序么

200bp左右序列，单条带，很亮，连接转化后蓝白筛选，白斑篮斑都有，挑选了10个左右白斑测序，测序结果都是空的，是不是这样做转不进去呢
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-02-26 10:30:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
楼主的问题听不懂。是说PCR产物没纯化除去PCR的缓冲液，就直接用T4连接酶和相应的缓冲液做连接吗？
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2021-02-26 13:25:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

454278916

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-02-26 13:25:21
楼主的问题听不懂。是说PCR产物没纯化除去PCR的缓冲液，就直接用T4连接酶和相应的缓冲液做连接吗？

emm...差不多吧，就是从PCR仪拿出来直接去做连接转化了，没用试剂盒纯化或者切胶回收
赞一下 回复此楼
3楼2021-02-26 17:09:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
引用回帖:
3楼: Originally posted by 454278916 at 2021-02-26 17:09:52
emm...差不多吧，就是从PCR仪拿出来直接去做连接转化了，没用试剂盒纯化或者切胶回收...

一般来说是做不出来的。不过这都不碍事儿，一天的工夫自己重新做一遍就好了
赞一下(1人) 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2021-02-27 09:57:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

454278916

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-02-27 09:57:52
一般来说是做不出来的。不过这都不碍事儿，一天的工夫自己重新做一遍就好了...

好的好的
回复此楼
5楼2021-02-27 13:06:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 454278916 的主题更新
51/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭