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【求助】平板计数的问题
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我最近做菌的稀释涂布实验，取了菌液1ml离心取上清，后加3ml生理盐水在600nm处测吸光度为0.6左右，据估计应该至少有5*10的8次方cfu/ml，因此拿菌液1ml去做稀释，共稀释了8个梯度，取6，7，8后三个稀释梯度涂布，但是第二天平板上却没有菌长出来，不知道为什么？请大虾帮忙分析一下原因。我做的是副溶血弧菌，阴性的。 期间，以为涂布棒过热把菌会不会热死了，后来又重做，等凉了蛮久再涂布，可还是不行。还做过对照实验，就是把6，7，8梯度的菌液取100ul到LB液体培养基中摇床，是摇出来的。所以现在就很奇怪了。做了几次都做不出。 |
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