| 查看: 1810 | 回复: 3 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者Gsjsh将赠送您 20 个金币 | ||
[求助]
构建过表达载体，基因CDS大片段缺失 已有2人参与
|
||
|
大家好，我最近想构建一个基因的过表达载体。从CDS中PCR该基因（3100bp)，条带单一，大小正确，回收的基因片段测通，序列正确。但是我用同源重组的方式，将基因片段连接到慢病毒载体上，转化后酶切验证，发现插入片段只有1000bp左右，测序也发现中间有2000多bp 的缺失。后面想到可能发生了细菌重组，从原来的DH5a感受态改为用Stbl3和Stable感受态，但是酶切结果显示插入片段还是只有不到1000bp。后来直接把胶回的基因片段连到T载体上，用Stbl3和Stable感受态转化，依然发现插入片段大范围缺失。 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有77人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
木元雨
木虫 (职业作家)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 5684.2
- 红花: 23
- 沙发: 13
- 帖子: 3370
- 在线: 195.3小时
- 虫号: 8195763
- 注册: 2018-03-07
- 性别: GG
- 专业: 作物分子育种
2楼2021-02-01 00:49:00
kangaroo0513
新虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 154 (高中生)
- 金币: 2277.4
- 散金: 100
- 红花: 29
- 帖子: 464
- 在线: 119.4小时
- 虫号: 2621902
- 注册: 2013-08-28
- 专业: 细胞物质运输
3楼2021-02-01 08:00:52
4楼2021-02-03 16:33:51
