24小时热门版块排行榜    

查看: 3573  |  回复: 17
【悬赏金币】回答本帖问题,作者TerryHLHL将赠送您 30 个金币

TerryHLHL

铜虫 (小有名气)

[求助] DNS法测定纤维素酶活的问题 已有2人参与

我最近在测纤维素降解菌的酶活力。这些菌有做过刚果红染色的纤维素平板,是明显有水解圈的。养在cmc-na发酵培养基里也有明显的浑浊。但是取粗提酶液用DNS法测了以后是完全没有酶活,不知道是为什么。另外,DNS试剂做葡萄糖的标曲也碰到了问题:加dns试剂后吸光度一直不稳定,越来越高,这是什么原因,请问有人遇到过吗?

非常急,希望有做过的大神能给解答!必有重谢!!!

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

TerryHLHL

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 小马哥4561 at 2021-03-26 13:36:16
延长酶反应时间试一试,标准曲线做不好可能与试剂配得不好或者反应方法不当有关。

现在发现问题是在低浓度的时候测不出吸光度。我做标曲的时候发现葡萄糖浓度为0.2mg/mL的时候吸光度只有0.00几,几乎就是空白了(梯度是按文献做的0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0),0.4-1.0范围吸光度和别人的吻合,但就是0.2测不出吸光度。我现在猜测可能就是因为30分钟酶活反应产生的还原糖的量就在这个测不出吸光度的范围,所以我才会测不出酶活。但是为什么测不出吸光度我琢磨了好久也没有研究出来,不知道您有没有遇到过这种情况

发自小木虫IOS客户端
13楼2021-04-08 13:15:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

碎梦醉蝶

新虫 (正式写手)

2楼2021-01-29 09:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青灯与酒

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
TerryHLHL(fuyuandj86代发): 金币+5 2021-04-26 18:15:41
DNS会不会失效了?

发自小木虫IOS客户端
6楼2021-03-23 11:47:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

TerryHLHL

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 碎梦醉蝶 at 2021-01-29 09:55:07
你的葡萄糖纯么?

葡萄糖用的AR的,应该算纯了吧,难道这个实验还要GR的?

发自小木虫IOS客户端
3楼2021-01-29 10:04:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

TerryHLHL

铜虫 (小有名气)

没人吗...看来做这个实验的人太少了

发自小木虫IOS客户端
4楼2021-01-30 16:20:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

TerryHLHL

铜虫 (小有名气)

5楼2021-02-04 17:33:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小马哥4561

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
TerryHLHL(fuyuandj86代发): 金币+5 2021-04-26 18:14:34
延长酶反应时间试一试,标准曲线做不好可能与试剂配得不好或者反应方法不当有关。

发自小木虫Android客户端
7楼2021-03-26 13:36:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海韵楠馨

新虫 (小有名气)

我也在做DNS实验,测的是α-淀粉酶活性抑制实验,结果吸光度也很不稳定。也不知道是什么原因
8楼2021-04-03 16:20:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海韵楠馨

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
TerryHLHL(fuyuandj86代发): 金币+5 2021-04-26 18:14:50
引用回帖:
3楼: Originally posted by TerryHLHL at 2021-01-29 10:04:58
葡萄糖用的AR的,应该算纯了吧,难道这个实验还要GR的?
...

AR的可以了,没必要用GR的。还有一个可能是移液枪有问题,每次吸的量差异有点大。
9楼2021-04-03 16:23:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

TerryHLHL

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 青灯与酒 at 2021-03-23 11:47:14
DNS会不会失效了?

我之前也以为dns失效了,但是后来买了现成的也是一样的问题。就是在低浓度的时候测不出吸光度(葡萄糖浓度小于0.2mg/mL的时候)

发自小木虫IOS客户端
10楼2021-04-08 13:01:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 TerryHLHL 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +7 瞬息宇宙 2026-09-01 14/700 2026-09-02 17:33 by ma0526
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
信息提示
请填处理意见