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bioman木虫之王 (著名写手)
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[交流]
【请教】丝素的溶解问题-已解决
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先将蚕丝在5g/L的碳酸钠溶液中煮沸1h，并洗涤数次后80度下烘干，然后在CaCl2/H2O/EtOH(1/8/2 molar ratio) 中在80度溶解，发现无法溶解，不知道什么原因，把溶解不了的丝素放在室温下，过夜后居然溶解了。 我的实验过程中可能存在以下问题： 配置CaCl2/H2O/EtOH时可能有一点误差不知道，是否影响溶解能力，另外我有点怀疑EtOH是不是搞错了。 谢谢各位。 我换了一种sigma产的CaCl2，可能是试剂问题。谢谢各位！ 注：试剂问题现在越来越显现出来了。 [ Last edited by bioman on 2009-7-29 at 11:30 ] |
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9楼2009-07-28 18:18:11
yongsu2009
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2楼2009-07-28 16:41:13
bioman
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3楼2009-07-28 16:42:40
yongsu2009
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薰衣草儿(金币+2,VIP+0):赞~欢迎继续讨论~ 7-28 17:16
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我明后天可能也要做了，这些天一直也是在看这方面的文献，把我总结的溶解丝素的方法给你看看： 溶解丝素的盐一般采取中性盐，常用CaCl2，也可用LiBr、LiSCN、MgNO3、ZnCl2等高浓度盐溶液，与水、乙醇按比例配置溶液。不同盐溶解的丝素质量、分子量、性能等都有差异。 脱盐方法主要有透析袋透析、中空纤维膜超滤、电渗析或凝胶过滤层析等方法。用中空纤维超滤脱盐法脱盐，时间短、批量大、脱盐效率高，同时浓缩了丝素溶液，使之可以直接进行冷冻干燥或喷雾干燥制成丝素粉末；而用透析袋脱盐，则耗时长，批量少，费用高。 方法一： 用1000g/L CaCl2水溶液溶解丝素纤维,溶解温度98℃,浴比1∶25,时间10min。将溶解后得到的溶液灌入纤维素透析膜(截留分子量12 000~14 000)中,在流水中透析3d。将透析后的溶液风干浓缩,得到丝素水溶液。 方法二： 脱胶后的丝素在浓度为9.3M的LiBr溶液中于60℃溶解4h，得到20%的溶液。将该溶液用截留分子量为3500的透析袋在去离子水中透析2d。丝素水溶液的最终浓度约为8%。用x一射线光电子能谱检测此8%的丝素溶液制得的丝素膜内Li+离子的残留量，结果未发现残留Li+。 方法三： 将丝素纤维用50%(质量与体积比)的CaCl2溶解丝素纤维,100℃煮沸10 min使丝素纤维全部溶解,冷却后透析72 h,得到无色透明丝素溶液。浓缩至浓度为20%~30%。 方法四： 将纯净的丝素放在50%(重量)氯化钙溶液中，98℃溶解10分钟(浴比1:25)。最后，将该溶液注人纤维素透析管中，用蒸馏水透析3天。将所得的丝素溶液浓度调节到1一10%(重量)。 方法五： 用质量分数为50%的CaCl2水溶液溶解丝素纤维,溶解温度98℃,浴比1∶25,时间10 min。将溶解后得到的溶液灌入纤维素透析膜(截留分子量12 000~14 000),在流水中透析3 d,然后将溶液风干浓缩,即得丝素蛋白(silk fibroin,简称SF)水溶液。 方法六：（兰州大学硕士学位论文中的方法） 按摩尔比1：8：2配制CaCl2/H2O/EtOH三元混合溶剂，并用滤纸过滤，得到所需的澄清三元溶剂。将称得的丝素开松，浸泡于所需量混合溶剂中，于30℃下溶胀1-2天，再于70℃水浴锅内搅拌3-4小时溶解；然后，将所制得的一定浓度的丝素溶液分别在流水及蒸馏水条件下进行透析2-3天，最后得到浅棕黄色丝素纯水溶液。 方法七： 将脱胶、脱蜡后的丝素加入摩尔比为1：8：2的CaC12一H2O一C2H5OH三元混合溶剂中 (浴比为1:5)，在具塞烧瓶中恒温搅拌溶解，温度为70士2℃。将所得到的丝素溶液进行透析，直至透析袋外去离子水的电导率与原来基本一致，然后过滤。 方法八： 将丝素纤维溶解在氯化钙、水和乙醇的(80 ±2) ℃三元溶剂中,溶透析3 d 以除去氯化钙和乙醇, 制得丝素蛋白的水溶液。 方法九： （1）丝素溶解 将丝素纤维以1：10的浴比放入CaCl2：H2O：C2H5OH=1：8：2（摩尔比）的混 合溶剂中，在72±2℃温度下，恒温磁力搅拌1h，即可得到棕黄色的丝素—CaCl2溶液 混合液。 （2）丝素溶液的透析 将丝素—CaCl2混合溶液倒进清洁的透析袋中，两头扎紧，先用流动的自来水透 析两天，再用去离子水透析一天。然后再经过过滤除掉溶液中的杂质后，存入试剂瓶， 放入冰箱中待用。 |
4楼2009-07-28 16:52:28
