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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 双酶切，酶连
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JH5HJ

禁虫 (正式写手)
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1楼 2020-12-26 21:33:22
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木元雨

木虫 (职业作家)
如果多次都连不上，还是跑个电泳看看大小对不对吧

发自小木虫Android客户端
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2楼2020-12-26 22:31:53
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匿名

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3楼2020-12-27 00:42:07
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匿名

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4楼2020-12-27 00:44:37
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didongwei

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

酶切之后还是要电泳验证的，胶回收的效率取决于回收片段的大小，过大或过小的片段回收效率都较低，可以用以下两种方法尝试优化：一是，将洗脱液二次加到柱膜中再次洗脱；二是增加酶切的体积。建议洗脱时直接用ddH2O洗脱，且需提前预热。
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不是优秀，而是不可替代
5楼2021-01-06 12:08:30
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正清哲和

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

你这情况有两个原因：一、胶回收试剂盒的wash buffer已经挥发了不少，乙醇浓度降低，导致吸附柱上的DNA被wash buffer带走很多，半年~一年的试剂盒效果变差都是这原因；二、PCR产物可以直接用清洁试剂盒回收，进入双酶切步骤，但双酶切后一定要切胶回收，也就是说连接之前一定要经过一次琼脂糖凝胶电泳切胶回收的
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对他人，可以善待、珍重，但无需寄以厚望，依旧充满感激 ，做好自己！
6楼2021-01-22 12:45:38
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JH5HJ

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
7楼2021-01-22 18:29:08
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