| 查看: 3060 | 回复: 5 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
α-葡萄糖苷酶抑制活性实验 已有1人参与
|
||
|
一、目前在体系优化，遇到的问题是：未出现平台期，每次实验所得数据有一定差距，曲线趋势不统一，无法确定最适酶浓度和底物蔗糖浓度，希望有前辈能提些建议。 二、实验用的方法是： ①0.1M的PBS 70ul和20ul酶混合预热10min,（空白组为不加酶，其他条件皆一致） ②加入20ul蔗糖反应30min， ③加入100ul的0.2M的碳酸钠终止，（以上反应在1.5ml的离心管内完成，与在酶标板内反应所得数据对比而言，前者反应更充分） ④取50ul反应液，往其中加入150ul葡萄糖工作液，再反应15min后酶标仪测OD。 三、但在体系优化这个环节就出现了问题，我参考文献，选取1.0U/ml的酶，加入不同浓度蔗糖（10、20、40、60、80、100、120、140、160mmol/l）但没有平台期，蔗糖60与80这边较平，但160的OD又很高。之后又重复了好几次，但是曲线规律不统一，仍然无法确定最适蔗糖浓度，但文献里又做出来了，不清楚我到底漏了什么细节，希望做过类似实验的前辈能指导一下。（ps先前我增加过终止液的浓度后，发现有平台期，但是测出来的数据太小了，意义不大。) @lifeliuyan 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
泣血叩求调剂恩，愿以丹心报师恩
已经有3人回复
-
274求调剂0856材料化工
已经有6人回复
-
0856化工原理
已经有3人回复
-
291分兽医专硕 一志愿华中农
已经有3人回复
-
工科0856专硕化学工程269能调剂吗
已经有8人回复
-
341求调剂
已经有3人回复
-
接受26届调剂生
已经有23人回复
-
311求调剂
已经有5人回复
-
308求调剂
已经有3人回复
-
271求调剂
已经有3人回复
zhangchaohua 
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 898.1
- 散金: 690
- 红花: 6
- 帖子: 636
- 在线: 87.6小时
- 虫号: 4253748
- 注册: 2015-11-29
- 专业: 动物系统及分类学
3楼2020-12-25 01:32:42
2楼2020-12-25 00:16:34
zbgood2009
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 102 (高中生)
- 金币: 18384.4
- 散金: 6970
- 红花: 23
- 帖子: 3407
- 在线: 310.6小时
- 虫号: 1086916
- 注册: 2010-09-01
- 性别: GG
- 专业: 药剂学
4楼2020-12-25 07:50:35
5楼2020-12-25 08:24:37
