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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 一种热稳定性高的酶，热保温后酶活力提高现象正常吗?
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ap372767129

铁虫 (正式写手)

[求助] 一种热稳定性高的酶，热保温后酶活力提高现象正常吗? 已有2人参与

各位老师好，
      我现在在做一种淀粉酶，在测热稳定性时，发现这种酶在室温放置1 h、50℃、60℃和70℃保温1 h或更长时间，然后在70℃温度下（最适反应温度）测酶活发现保温后的酶都比常温下放置酶的酶活高，并且保温时间越长，酶活力呈现升高趋势，酶活可提高200%以上。请问这种淀粉酶的酶活力变化现象是正常的吗，是否有类似的很多酶都是这种现象？大部分酶的活力我发现都是随着保温时间延长，活力下降的。
           
          谢谢！
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1楼 2020-12-22 10:59:34
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酶是从冷冻的母液里解冻的还是干粉配的？如果是干粉的话可能是因为没有完全溶解。
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2020-12-22 12:03:38
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ap372767129(fuyuandj86代发): 金币+10 2020-12-30 14:32:31
（1）有没有可能酶里面有抑制剂，但是加热能让抑制剂灭活？
（2）酶里面有水解酶，加热让水解酶失活？
（3）酶原在加热后转变成有活性的酶？
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行至水穷处，坐看云起时
3楼2020-12-22 13:06:21
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ap372767129

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2020-12-22 12:03:38
酶是从冷冻的母液里解冻的还是干粉配的？如果是干粉的话可能是因为没有完全溶解。

谢谢您的回复，我的酶是异源表达后纯化得到的纯酶液，是液态的
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4楼2020-12-22 14:03:10
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ap372767129

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by pennchem at 2020-12-22 13:06:21
（1）有没有可能酶里面有抑制剂，但是加热能让抑制剂灭活？
（2）酶里面有水解酶，加热让水解酶失活？
（3）酶原在加热后转变成有活性的酶？

谢谢老师您的回复，我的酶是异源表达后纯化得到的纯酶液，缓冲体系是Tris-HCl，应该是没有抑制剂的。有可能是加热后酶的活力被激活，我想知道这种加热保温后能够被激活的现象是一种常见的现象吗？
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5楼2020-12-22 14:06:42
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
ap372767129(fuyuandj86代发): 金币+10 2020-12-30 14:32:11
引用回帖:
5楼: Originally posted by ap372767129 at 2020-12-22 14:06:42
谢谢老师您的回复，我的酶是异源表达后纯化得到的纯酶液，缓冲体系是Tris-HCl，应该是没有抑制剂的。有可能是加热后酶的活力被激活，我想知道这种加热保温后能够被激活的现象是一种常见的现象吗？...

不常见。一般而言，加热会让蛋白酶失活。即使是耐热的酶，加热后有部分蛋白失活，活性变低。（高温下，分子运动加剧，导致部分蛋白变性）

加热后，活性更高，不是活力被激活，活性更高（hyperactive)可能更确切一些。和这个类似的例子有，热启动Taq酶，加热后，修饰或抗体失活，有活性的酶释放出来，表现就是加热酶的活性出来了。
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行至水穷处，坐看云起时
6楼2020-12-23 09:18:54
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上岸君ing

新虫 (初入文坛)
您好，请问这个酶的情况您后面做原因分析了吗？我现在也遇到了类似情况，热稳定性数据看起来就很奇怪
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7楼2025-04-16 12:24:40
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pennchem

专家顾问 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 上岸君ing at 2025-04-16 12:24:40
您好，请问这个酶的情况您后面做原因分析了吗？我现在也遇到了类似情况，热稳定性数据看起来就很奇怪

方便提供反应的具体情况（实验方式，对比数据）吗？ 我想理解一下这种情况发生的原因。 可以隐藏酶和底物信息，但是反应条件和操作细节尽量提供吧。
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行至水穷处，坐看云起时
8楼2025-04-16 16:37:07
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