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muchong5577

金虫 (正式写手)

[交流] 酶切方案

Takara的BamHI 和Fermentas的NdeI 同时双酶切,用谁自带的buffer,还是什么buffer?
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shensc727

金虫 (小有名气)


muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢了 7-24 09:36
为什么不用同一个公司的酶呀?每个公司的酶切buffer都不一样,用法也不同,建议你换成同一公司的酶!
再者,你可以用酶切通用buffer试试,在分子克隆这本书上可以找到配方!
2楼2009-07-24 09:29:23
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liby

铜虫 (初入文坛)

应该用同一个公司的酶,宝生物的书上就有双酶切共用的Buffer的一个表,查一下
3楼2009-07-24 10:54:46
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yanlili

金虫 (正式写手)



muchong5577(金币+1,VIP+0):以后要鉴定阳性转化子,分开切不是很忙烦不? 7-25 21:19
你可以分别单酶切啊,就不用考虑这个问题了
4楼2009-07-24 12:11:32
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zplipeng

金虫 (著名写手)

卖产品的时候不是都带着buffer么
加油哦↖(^ω^)↗,O(∩_∩)O哈哈~
5楼2009-07-24 12:30:47
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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)

哪个公司的产品都可以,因为酶是一样的
6楼2009-07-24 12:42:16
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houjinglhy

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muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢 7-25 21:18
影响不大 我之前用ferment 和 takara 的酶buffer都混着用的
似乎没有影响酶切效率
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
7楼2009-07-24 13:19:38
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wyzl2007

金虫 (小有名气)

单酶切即可
8楼2009-07-24 13:56:09
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hongrunge

铁杆木虫 (小有名气)

应该用同一个公司的产品。特别是buffer,不同公司的buffer可能会存在差异而影响实验。也可以先用大体系单酶切,然后乙醇沉淀,再进行另一种酶切。
9楼2009-07-24 22:41:03
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yanlili

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
连接的时候为了保证活性你可以分别单酶切
做验证的时候只要能切下来就行,双酶切即使活力不高也没事
而且验证你可以用测序引物进行pcr验证即可
10楼2009-07-26 07:41:08
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