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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶切方案
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muchong5577

金虫 (正式写手)

[交流] 酶切方案

Takara的BamHI 和Fermentas的NdeI 同时双酶切，用谁自带的buffer，还是什么buffer？
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1楼 2009-07-24 09:15:09
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shensc727

金虫 (小有名气)
★
muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢了 7-24 09:36
为什么不用同一个公司的酶呀？每个公司的酶切buffer都不一样，用法也不同，建议你换成同一公司的酶！
再者，你可以用酶切通用buffer试试，在分子克隆这本书上可以找到配方！
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2楼2009-07-24 09:29:23
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liby

铜虫 (初入文坛)
应该用同一个公司的酶，宝生物的书上就有双酶切共用的Buffer的一个表，查一下
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3楼2009-07-24 10:54:46
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yanlili

金虫 (正式写手)
★
muchong5577(金币+1,VIP+0):以后要鉴定阳性转化子，分开切不是很忙烦不？ 7-25 21:19
你可以分别单酶切啊，就不用考虑这个问题了
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4楼2009-07-24 12:11:32
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zplipeng

金虫 (著名写手)
卖产品的时候不是都带着buffer么
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加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~
5楼2009-07-24 12:30:47
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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)
哪个公司的产品都可以，因为酶是一样的
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6楼2009-07-24 12:42:16
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由，人权之基。

优秀版主
★
muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢 7-25 21:18
影响不大 我之前用ferment 和 takara 的酶buffer都混着用的
似乎没有影响酶切效率
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从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！
7楼2009-07-24 13:19:38
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wyzl2007

金虫 (小有名气)
单酶切即可
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8楼2009-07-24 13:56:09
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hongrunge

铁杆木虫 (小有名气)
应该用同一个公司的产品。特别是buffer，不同公司的buffer可能会存在差异而影响实验。也可以先用大体系单酶切，然后乙醇沉淀，再进行另一种酶切。
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9楼2009-07-24 22:41:03
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yanlili

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
连接的时候为了保证活性你可以分别单酶切
做验证的时候只要能切下来就行，双酶切即使活力不高也没事
而且验证你可以用测序引物进行pcr验证即可
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10楼2009-07-26 07:41:08
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