版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

调剂小程序

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4202)
>考研 (1533)
>导师招生 (810)
>虫友互识 (310)
>休闲灌水 (309)
>文献求助 (154)
>考博 (146)
>论文投稿 (120)
>硕博家园 (91)
>公派出国 (70)
>招聘信息布告栏 (48)
>博后之家 (44)
>教师之家 (27)
>基金申请 (25)
>找工作 (25)
>论文道贺祈福 (17)

当前主题已经存档。

muchong5577

金虫 (正式写手)

BioEPI: 1
应助: 6 (幼儿园)
金币: 929.2
散金: 67
红花: 3
帖子: 675
在线: 136.6小时
虫号: 703384
注册: 2009-02-18
性别: GG
专业: 生物化学

[交流] 酶切方案

Takara的BamHI 和Fermentas的NdeI 同时双酶切，用谁自带的buffer，还是什么buffer？

» 猜你喜欢

312求调剂已经有4人回复
304求调剂已经有6人回复
0856材料求调剂已经有8人回复
博士自荐已经有9人回复
272求调剂已经有3人回复
311求调剂已经有3人回复
295求调剂已经有3人回复
298求调剂已经有4人回复
280求调剂已经有6人回复
博士推荐已经有4人回复

1楼 2009-07-24 09:15:09

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

shensc727

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 506.1
帖子: 128
在线: 1.8小时
虫号: 460395
注册: 2007-11-16
性别: GG
专业: 发酵工程

★
muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢了 7-24 09:36

为什么不用同一个公司的酶呀？每个公司的酶切buffer都不一样，用法也不同，建议你换成同一公司的酶！
再者，你可以用酶切通用buffer试试，在分子克隆这本书上可以找到配方！

赞一下(1人)

2楼2009-07-24 09:29:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

liby

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 145
帖子: 46
在线: 15.7小时
虫号: 785759
注册: 2009-06-03
性别: MM
专业: 微生物资源与分类学

应该用同一个公司的酶，宝生物的书上就有双酶切共用的Buffer的一个表，查一下

3楼2009-07-24 10:54:46

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yanlili

金虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 96.5
散金: 124
帖子: 453
在线: 43.5小时
虫号: 671868
注册: 2008-12-10
性别: MM
专业: 生物大分子结构与功能

★
muchong5577(金币+1,VIP+0):以后要鉴定阳性转化子，分开切不是很忙烦不？ 7-25 21:19

你可以分别单酶切啊，就不用考虑这个问题了

4楼2009-07-24 12:11:32

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zplipeng

金虫 (著名写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1191.1
散金: 103
红花: 1
帖子: 1411
在线: 65.7小时
虫号: 583579
注册: 2008-07-25
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

卖产品的时候不是都带着buffer么

加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~

5楼2009-07-24 12:30:47

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 19370.7
帖子: 1388
在线: 150.3小时
虫号: 315719
注册: 2007-03-03
性别: GG
专业: 林木遗传育种学

哪个公司的产品都可以，因为酶是一样的

6楼2009-07-24 12:42:16

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由，人权之基。

BioEPI: 1
应助: 21 (小学生)
贵宾: 0.911
金币: 5168.5
散金: 3205
红花: 137
沙发: 93
帖子: 10564
在线: 912.9小时
虫号: 461324
注册: 2007-11-18
专业: 生物技术药物
管辖: 公派出国

★
muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢 7-25 21:18

影响不大我之前用ferment 和 takara 的酶buffer都混着用的
似乎没有影响酶切效率

从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！

7楼2009-07-24 13:19:38

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

wyzl2007

金虫 (小有名气)

应助: 10 (幼儿园)
金币: 1135.2
红花: 2
帖子: 250
在线: 58.8小时
虫号: 167324
注册: 2006-01-15
性别: GG
专业: 生物化学

单酶切即可

8楼2009-07-24 13:56:09

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

hongrunge

铁杆木虫 (小有名气)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 7988.6
帖子: 286
在线: 272.8小时
虫号: 584934
注册: 2008-08-01
专业: 环境微生物学

应该用同一个公司的产品。特别是buffer，不同公司的buffer可能会存在差异而影响实验。也可以先用大体系单酶切，然后乙醇沉淀，再进行另一种酶切。

9楼2009-07-24 22:41:03

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yanlili

金虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 96.5
散金: 124
帖子: 453
在线: 43.5小时
虫号: 671868
注册: 2008-12-10
性别: MM
专业: 生物大分子结构与功能

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

连接的时候为了保证活性你可以分别单酶切
做验证的时候只要能切下来就行，双酶切即使活力不高也没事
而且验证你可以用测序引物进行pcr验证即可

赞一下(1人)

10楼2009-07-26 07:41:08

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 muchong5577 的主题更新