应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » SDS-PAGE转膜后用考马斯亮蓝R250对凝胶染色，脱色，结果什么都没有，为什么呢？
61/1返回列表
查看: 3201  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者蛋黄酱假面将赠送您 5 个金币

蛋黄酱假面

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE转膜后用考马斯亮蓝R250对凝胶染色，脱色，结果什么都没有，为什么呢？ 已有2人参与

转膜后，PVDF膜上看Marker倒是都转过去了，想看转膜率怎么样就用考马斯亮蓝染色，结果凝胶染色后是变蓝了，脱色整个过程都没有条带出现，求有经验的大神指导哇!

染色液：
甲醇                     50mL
冰醋酸                   10mL
去离子水                 40mL
考马斯亮蓝R-250           0.25g

脱色液：
甲醇                     100mL
冰醋酸                   20mL
去离子水                  80mL
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2020-10-21 22:45:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junjieshao

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
2楼2020-10-22 04:29:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

追寻1993day

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
凝胶上没有蛋白就说明全部转导膜上面去了啊
赞一下 回复此楼
3楼2020-10-22 09:04:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蛋黄酱假面

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by junjieshao at 2020-10-22 04:29:32
转膜后，蛋白都到膜上了，胶上没有，正常啊。
你是说用考马斯亮蓝染pvdf膜？一般用丽春红染，染后还可以继续做western blot，用了考马斯，你western 就做不了了。
没用过考马斯亮蓝染pvdf膜。

是用考染凝胶，看转膜率的。我老师说不可能一点没有
赞一下 回复此楼
4楼2020-10-23 21:20:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蛋黄酱假面

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 追寻1993day at 2020-10-22 09:04:08
凝胶上没有蛋白就说明全部转导膜上面去了啊

我老师说不可能全部转过去的，怎么都得有点蛋白条带的痕迹。结果我的脱色后就是透明的凝胶，一条条带都没有
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2020-10-23 21:21:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junjieshao

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
6楼2020-10-24 02:37:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蛋黄酱假面 的主题更新
61/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题 +5 瞬息宇宙 2026-09-01 11/550 2026-09-02 14:15 by simwe390
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭