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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » SDS-PAGE转膜后用考马斯亮蓝R250对凝胶染色，脱色，结果什么都没有，为什么呢？
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蛋黄酱假面

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE转膜后用考马斯亮蓝R250对凝胶染色，脱色，结果什么都没有，为什么呢？ 已有2人参与

转膜后，PVDF膜上看Marker倒是都转过去了，想看转膜率怎么样就用考马斯亮蓝染色，结果凝胶染色后是变蓝了，脱色整个过程都没有条带出现，求有经验的大神指导哇!

染色液：
甲醇                     50mL
冰醋酸                   10mL
去离子水                 40mL
考马斯亮蓝R-250           0.25g

脱色液：
甲醇                     100mL
冰醋酸                   20mL
去离子水                  80mL
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1楼 2020-10-21 22:45:29
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junjieshao

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
2楼2020-10-22 04:29:32
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追寻1993day

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
凝胶上没有蛋白就说明全部转导膜上面去了啊
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3楼2020-10-22 09:04:08
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蛋黄酱假面

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by junjieshao at 2020-10-22 04:29:32
转膜后，蛋白都到膜上了，胶上没有，正常啊。
你是说用考马斯亮蓝染pvdf膜？一般用丽春红染，染后还可以继续做western blot，用了考马斯，你western 就做不了了。
没用过考马斯亮蓝染pvdf膜。

是用考染凝胶，看转膜率的。我老师说不可能一点没有
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4楼2020-10-23 21:20:04
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蛋黄酱假面

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 追寻1993day at 2020-10-22 09:04:08
凝胶上没有蛋白就说明全部转导膜上面去了啊

我老师说不可能全部转过去的，怎么都得有点蛋白条带的痕迹。结果我的脱色后就是透明的凝胶，一条条带都没有
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2020-10-23 21:21:02
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junjieshao

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
6楼2020-10-24 02:37:24
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