24小时热门版块排行榜    

查看: 497  |  回复: 4
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

chg952

金虫 (小有名气)

[交流] 急(RNA干扰载体转水稻以及验证问题)

各位大虾:

如何验证RNA干扰载体转入水稻?有哪些转水稻的方法.比较快捷而又有效率的方法。

除了GUS活性检测,mRNA反转录做RT-PCR,还有啥可以初步检测的方法吗?

可以提DNA然后PCR检测吗?如果可以,那验证出来说明什么问题?如果不可以,那理由?干扰载体的验证跟一般转基因植株的验证有什么差别?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aga0110125

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
DNA是不能证明表达的,很多实验目的基因转入成功,但是并不表达,这与基因插入的位置等等很多因素相关,就算带了35S启动子,也不一定表达的,所以严谨点,后面要检测表达结果,一般north还是必要的,如果不想测real time的话

[ Last edited by aga0110125 on 2009-7-23 at 09:51 ]
4楼2009-07-23 09:49:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

aga0110125

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
提DNA然后PCR检测只能证明转基因是否成功,不能放映干扰的效果,只是GUS的进一步确定检测而已,一般都要做你所干扰基因的real-time检测和之后的表型结果检测的。
2楼2009-07-22 14:34:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

六妖妖

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
主要还是表达量的差异吧。干扰成功后被干扰的基因表达量应该是下调,需要用RNA来做。普通转基因只要验证转入基因是否有表达,直接提DNA做就好。
3楼2009-07-22 20:39:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kinglong09

木虫 (小有名气)

楼上说的很好,支持
5楼2009-07-24 15:47:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
信息提示
请填处理意见