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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » 最近做EMSA实验蛋白质堵塞点样孔，想请教一下是什么问题啊？
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【悬赏金币】回答本帖问题，作者张全蛋阿！将赠送您 5 个金币

张全蛋阿！

铁虫 (小有名气)

[求助] 最近做EMSA实验蛋白质堵塞点样孔，想请教一下是什么问题啊？ 已有1人参与

我用的是Fam荧光标记的核酸底物，电泳后直接曝光，荧光显色，蛋白质和核酸结合后就可出现在上方条带。

但是最近用了两种方法，左图为PAGE胶跑的，样品会堵塞在点样孔。  右图为琼脂糖凝胶电泳跑的。会跑出来一点点。

PI是10左右，TAE TBE缓冲液都用过，想请教一下各位大佬怎样才能让PAGE胶样品进孔。

最近做EMSA实验蛋白质堵塞点样孔，想请教一下是什么问题啊？
QQ图片20201013102214.png


最近做EMSA实验蛋白质堵塞点样孔，想请教一下是什么问题啊？-1
QQ图片20201013102309.png@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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1楼 2020-10-13 10:30:46
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ramlim

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的蛋白很可能容易形成聚集体。但是从你的图来看蛋白跟核酸有结合。你可以试试在蛋白和核酸孵育前，将蛋白告诉离心，取上清做实验。另外，尽量用新纯化好的蛋白来做、
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2楼2020-10-19 13:01:33
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