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张全蛋阿!

铁虫 (小有名气)

[求助] 最近做EMSA实验蛋白质堵塞点样孔,想请教一下是什么问题啊? 已有1人参与

我用的是Fam荧光标记的核酸底物,电泳后直接曝光,荧光显色,蛋白质和核酸结合后就可出现在上方条带。

但是最近用了两种方法,左图为PAGE胶跑的,样品会堵塞在点样孔。  右图为琼脂糖凝胶电泳跑的。会跑出来一点点。

PI是10左右,TAE TBE缓冲液都用过,想请教一下各位大佬怎样才能让PAGE胶样品进孔。

最近做EMSA实验蛋白质堵塞点样孔,想请教一下是什么问题啊?
QQ图片20201013102214.png


最近做EMSA实验蛋白质堵塞点样孔,想请教一下是什么问题啊?-1
QQ图片20201013102309.png@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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ramlim

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的蛋白很可能容易形成聚集体。但是从你的图来看蛋白跟核酸有结合。你可以试试在蛋白和核酸孵育前,将蛋白告诉离心,取上清做实验。另外,尽量用新纯化好的蛋白来做、
2楼2020-10-19 13:01:33
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