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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求指教，含有SacB基因的大肠杆菌在10%蔗糖平板可正常生长是什么原因？
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Oliver J

新虫 (初入文坛)

[交流] 求指教，含有SacB基因的大肠杆菌在10%蔗糖平板可正常生长是什么原因？ 已有2人参与

表达SacB基因的载体构建成功之后（已测序验证），将含有该载体的大肠杆菌DH5α涂布至含有10%蔗糖的LB平板，发现可以正常生长，文献报道含有SacB基因的大肠杆菌在蔗糖浓度为5%或10%就不能生长了。

那可能的原因:

1.表达SacB的启动子太弱，SacB表达量不够？

2.含有10%蔗糖的LB固体培养基配置有问题？我是把LB固体培养基（121℃，20min）和蔗糖(115℃，30min)分开灭菌，倒平板之前混匀加的卡那。

3.大肠杆菌DH5α不适合用于蛋白表达？作为克隆菌株，DH5α的蛋白表达量虽然低，但是也能使蛋白正常表达吧，我用同样的启动子在DH5α表达LacZ基因（3075 bp）都成功了。

有做过相关实验的老师同学还请多多指教

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1楼 2020-10-02 17:42:35
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momo莫模

新虫 (小有名气)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by Oliver J at 2020-10-08 10:45:15
我更换了SacB的启动子
...

你好，我想问下是通过替换启动子解决的SacB不致死的问题吗
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4楼2024-11-20 11:27:52
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biosci

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Sacb的启动子在大肠里面不启动

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Oliver J
2楼2020-10-02 18:18:56
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Oliver J

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2020-10-02 18:18:56
Sacb的启动子在大肠里面不启动

我更换了SacB的启动子

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momo莫模
3楼2020-10-08 10:45:15
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