24小时热门版块排行榜    

查看: 2399  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Oliver J

新虫 (初入文坛)

[交流] 求指教,含有SacB基因的大肠杆菌在10%蔗糖平板可正常生长是什么原因? 已有2人参与

表达SacB基因的载体构建成功之后(已测序验证),将含有该载体的大肠杆菌DH5α涂布至含有10%蔗糖的LB平板,发现可以正常生长,文献报道含有SacB基因的大肠杆菌在蔗糖浓度为5%或10%就不能生长了。

那可能的原因:

1.表达SacB的启动子太弱,SacB表达量不够?

2.含有10%蔗糖的LB固体培养基配置有问题?我是把LB固体培养基(121℃,20min)和蔗糖(115℃,30min)分开灭菌,倒平板之前混匀加的卡那。

3.大肠杆菌DH5α不适合用于蛋白表达?作为克隆菌株,DH5α的蛋白表达量虽然低,但是也能使蛋白正常表达吧,我用同样的启动子在DH5α表达LacZ基因(3075 bp)都成功了。

有做过相关实验的老师同学还请多多指教

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

momo莫模

新虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by Oliver J at 2020-10-08 10:45:15
我更换了SacB的启动子
...

你好,我想问下是通过替换启动子解决的SacB不致死的问题吗
4楼2024-11-20 11:27:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

biosci

捐助贵宾 (知名作家)


★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
Sacb的启动子在大肠里面不启动

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2020-10-02 18:18:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Oliver J

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2020-10-02 18:18:56
Sacb的启动子在大肠里面不启动

我更换了SacB的启动子

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2020-10-08 10:45:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 27博士申请 +3 白白白ly 2026-11-09 3/150 2026-11-09 21:39 by szq0819
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 3/150 2026-11-09 21:05 by FChKX8meu1ds
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”:确已离世,正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
请填处理意见