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Oliver J

新虫 (初入文坛)

[交流] 求指教,含有SacB基因的大肠杆菌在10%蔗糖平板可正常生长是什么原因? 已有2人参与

表达SacB基因的载体构建成功之后(已测序验证),将含有该载体的大肠杆菌DH5α涂布至含有10%蔗糖的LB平板,发现可以正常生长,文献报道含有SacB基因的大肠杆菌在蔗糖浓度为5%或10%就不能生长了。

那可能的原因:

1.表达SacB的启动子太弱,SacB表达量不够?

2.含有10%蔗糖的LB固体培养基配置有问题?我是把LB固体培养基(121℃,20min)和蔗糖(115℃,30min)分开灭菌,倒平板之前混匀加的卡那。

3.大肠杆菌DH5α不适合用于蛋白表达?作为克隆菌株,DH5α的蛋白表达量虽然低,但是也能使蛋白正常表达吧,我用同样的启动子在DH5α表达LacZ基因(3075 bp)都成功了。

有做过相关实验的老师同学还请多多指教

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biosci

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Sacb的启动子在大肠里面不启动

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2楼2020-10-02 18:18:56
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Oliver J

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2020-10-02 18:18:56
Sacb的启动子在大肠里面不启动

我更换了SacB的启动子

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3楼2020-10-08 10:45:15
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momo莫模

新虫 (小有名气)


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3楼: Originally posted by Oliver J at 2020-10-08 10:45:15
我更换了SacB的启动子
...

你好,我想问下是通过替换启动子解决的SacB不致死的问题吗
4楼2024-11-20 11:27:52
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