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zhangsh

金虫 (小有名气)

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虫号: 375963
注册: 2007-05-19
专业: 分析化学

[交流] 关于细菌素的分离纯化

各位大侠：
本人做的是关于短芽孢杆菌产细菌素的分离纯化，超滤对我的发酵液浓缩效果不明显，滤出液也有活性，请问有什么更好的处理大批量发酵液的浓缩办法？之后我是用透析袋浓缩，外边洒PEG20000粉末，但是处理量太小，而且在我过完离子柱即DEAE-52后收集的洗脱峰有抑菌活性，但是经透析袋浓缩（外边洒PEG20000粉)后再过完分子柱S-100后收集的蛋白峰没有抑菌活性，能帮忙分析一下原因吗？谢谢！请多多指教！

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1楼2009-07-17 20:10:11

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

lilisimahui

木虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 523817
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专业: 食品微生物

★ ★
zhangsh(金币+2,VIP+0): 8-2 15:23

你过完离子交换后有抑菌活性，那你的离子交换是用缓冲液进行洗脱的吧？有没有用缓冲液再做一个空白对照呢？因为有的时候，盐溶液也可以抑制微生物的生长。再者，如果透析袋不能很好的浓缩的话（细菌素浓度太低也可能检测不出抑菌活性），可以试试旋转蒸发浓缩，这个可以浓缩的浓度很大，但要注意条整好温度，温度太高怕你的细菌素会变性或者发生其他改变，都有可能。