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汕头大学海洋科学接受调剂
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zhangsh

金虫 (小有名气)

[交流] 关于细菌素的分离纯化

各位大侠:
       本人做的是关于短芽孢杆菌产细菌素的分离纯化,超滤对我的发酵液浓缩效果不明显,滤出液也有活性,请问有什么更好的处理大批量发酵液的浓缩办法?之后我是用透析袋浓缩,外边洒PEG20000粉末,但是处理量太小,而且在我过完离子柱即DEAE-52后收集的洗脱峰有抑菌活性,但是经透析袋浓缩(外边洒PEG20000粉)后再过完分子柱S-100后收集的蛋白峰没有抑菌活性,能帮忙分析一下原因吗?谢谢!请多多指教!
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简约豆豆

金虫 (小有名气)

★ ★
zhangsh(金币+2,VIP+0): 12-24 22:36
我现在做的也是分离纯化细菌素,在很多文献里见过,透析的时候外面用的是像磷酸或者醋酸的缓冲液,从来没有见过用PEG20000?你是想用双水相吗?

还有就是,你用DEAE柱子后,检测既然有活性,就接着用其它色谱方法,例如凝胶层析,之后用反相层析。
建议你没做一步纯化,除了做抑菌活性外,再跑下电泳验证一下,是否有东西存在哦!
  我们现在也正处在纯化阶段。
11楼2009-12-24 21:00:42
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lilisimahui

木虫 (小有名气)

★ ★
zhangsh(金币+2,VIP+0): 7-20 19:05
你的目的是要浓缩还是要纯化?过超滤柱是培养基上清液吗?
无欲则刚
2楼2009-07-18 16:51:19
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zhangsh

金虫 (小有名气)

我的目的是对发酵上清浓缩后再进行纯化,以保证后续目的蛋白的得率。
3楼2009-07-21 13:35:34
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

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优秀版主

★ ★
zhangsh(金币+2,VIP+0): 7-24 10:03
细菌素里是不是有稀有氨基酸 需不需要修饰个别氨基酸?
或者是不是你的处理破坏了这些稀有氨基酸的结构
据我所知 细菌素都是比较小肽 一般不存在高级结构吧
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
4楼2009-07-21 14:34:18
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