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HK驱魔者

铁虫 (正式写手)

[求助] 酶切连接不成功已有4人参与

酶切连接总是没有阳性子,我的基因是菌p得来的,三个基因,我用overlap连起来总长3900bp,载体是petduet-1,酶切位点ecor1和hind3做了一个多月了,试过各种连接比例。我现在在想会不会是我目的基因有什么问题?

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qaz199018

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼上正解,我们用的诺唯赞的多片段同源重组酶,基本一次成功。(此处不是广告)
~~~
3楼2020-08-18 21:52:54
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药学小生

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
多片段连接可用无缝克隆一步与线性化载体构建重组质粒
2楼2020-08-18 20:01:36
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ljr080808

捐助贵宾 (小有名气)

5楼2020-08-19 08:59:09
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liuj2020

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以试试一步克隆,很方便
10楼2020-08-20 21:11:59
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黑七泷胶庄

新虫 (初入文坛)

确定同源臂设计没问题吗,连不起来很大部分原因是你的同源臂设计不合理

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11楼2020-08-20 22:43:57
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junjieshao

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

4楼2020-08-19 04:18:39
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犹怜草木青

木虫 (职业作家)

热心群众铁柱儿

引用回帖:
3楼: Originally posted by qaz199018 at 2020-08-18 21:52:54
楼上正解,我们用的诺唯赞的多片段同源重组酶,基本一次成功。(此处不是广告)

突然看到了我们公司的名字

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铁柱儿是个温柔的姐姐
6楼2020-08-19 11:59:12
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JICK159

木虫 (正式写手)

感觉和我们以前实验室遇到问题很像,各种连不上,更多情况都是不长
7楼2020-08-19 13:57:18
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qaz199018

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 犹怜草木青 at 2020-08-19 12:59:12
突然看到了我们公司的名字
...

不考虑给点代言费吗
~~~
8楼2020-08-19 16:30:00
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犹怜草木青

木虫 (职业作家)

引用回帖:
8楼: Originally posted by qaz199018 at 2020-08-19 16:30:00
不考虑给点代言费吗...



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9楼2020-08-19 19:37:01
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