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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶切连接不成功
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HK驱魔者

铁虫 (正式写手)

[求助] 酶切连接不成功 已有4人参与

酶切连接总是没有阳性子，我的基因是菌p得来的，三个基因，我用overlap连起来总长3900bp，载体是petduet-1，酶切位点ecor1和hind3做了一个多月了，试过各种连接比例。我现在在想会不会是我目的基因有什么问题？

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1楼 2020-08-18 18:12:50
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junjieshao

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2020-08-19 04:18:39
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药学小生

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
多片段连接可用无缝克隆一步与线性化载体构建重组质粒
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2楼2020-08-18 20:01:36
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qaz199018

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼上正解，我们用的诺唯赞的多片段同源重组酶，基本一次成功。（此处不是广告）
赞一下(2人) 回复此楼
~~~
3楼2020-08-18 21:52:54
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ljr080808

捐助贵宾 (小有名气)
或者试试AQUA cloning?

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5楼2020-08-19 08:59:09
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