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ap372767129铁虫 (正式写手)
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[求助]
关于测定异淀粉酶酶活的问题
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各位老师，目前我在使用碘法测定异淀粉酶活力。按道理来说，加入异淀粉酶脱支后反应的产物，再加入碘显色在610 nm下吸光度值会升高。但是我发现在酶反应后的产物中加入碘液（100 μL反应产物+100 μL 0.01 M I2-0.1 M KI）会迅速生成很多小颗粒状沉淀，再加7.8 mL水稀释后，颗粒沉淀虽然部分溶解但仍然会有很多细小颗粒存在，这样就严重影响样品平行性。之前做过加入稀释后的碘液测，虽然没有颗粒沉淀产生，但是样品之间吸光度无显著差异。如何才能防止颗粒状沉淀的生成呢？我看文献中操作都是产物中加入碘再加水，显色一段时间后直接测定其吸光度值。但是我的样品出现沉淀，这就导致样品之间平行性十分差。请懂的老师不吝解答，谢谢！ |
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