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RNA浓度调整一致
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dongnong
新虫
(初入文坛)
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(幼儿园)
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在线: 3.1小时
虫号: 3368245
[交流]
RNA浓度调整一致
将不同处理方式的样本RNA浓度调整一致,然后进行反转录和荧光定量PCR,不明白的是如果RNA的浓度调整一致,那Ct值应该也是相同的吧,那这样的话,浓度调整一致的意义是什么呢?
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1楼
2020-07-15 17:04:38
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赤玉子
金虫
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帖子: 440
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虫号: 751517
★
dongnong(金币+1): 谢谢参与
最好调整一致。用核酸检测仪,OD值判断的。一般80-100
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9楼
2020-07-20 11:38:14
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学而时习
金虫
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虫号: 1821036
★
dongnong(金币+1): 谢谢参与
浓度一致,表明对照样和处理样的样本数量是一样的,这样才有可比性,保证内参基因的CT值是一样的,但不同处理会影响目的基因的表达,导致CT值出现差异,然后根据公式计算相对表达量
发自小木虫Android客户端
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2楼
2020-07-15 20:23:01
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Italyhope
金虫
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虫号: 1631586
★
dongnong(金币+1): 谢谢参与
将rna量调整成一样类似于western blot中你上样相同总量的蛋白,但是你感兴趣的蛋白在不同处理下表达量是不一样的。一样的,你的处理如果对目标基因mrna有影响,ct值又怎么会一样呢?
发自小木虫IOS客户端
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3楼
2020-07-15 20:27:46
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爆炒小木虫
新虫
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帖子: 221
在线: 95.8小时
虫号: 15655282
★
dongnong(金币+1): 谢谢参与
总量一致,内容物不一致,也就是潜在的模板不一样。所以通过ct值来反应表达量
发自小木虫Android客户端
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4楼
2020-07-15 23:26:15
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