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dongnong

新虫 (初入文坛)


[交流] RNA浓度调整一致

将不同处理方式的样本RNA浓度调整一致,然后进行反转录和荧光定量PCR,不明白的是如果RNA的浓度调整一致,那Ct值应该也是相同的吧,那这样的话,浓度调整一致的意义是什么呢?
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赤玉子

金虫 (正式写手)



dongnong(金币+1): 谢谢参与
最好调整一致。用核酸检测仪,OD值判断的。一般80-100
9楼2020-07-20 11:38:14
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学而时习

金虫 (小有名气)



dongnong(金币+1): 谢谢参与
浓度一致,表明对照样和处理样的样本数量是一样的,这样才有可比性,保证内参基因的CT值是一样的,但不同处理会影响目的基因的表达,导致CT值出现差异,然后根据公式计算相对表达量

发自小木虫Android客户端
2楼2020-07-15 20:23:01
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Italyhope

金虫 (正式写手)



dongnong(金币+1): 谢谢参与
将rna量调整成一样类似于western blot中你上样相同总量的蛋白,但是你感兴趣的蛋白在不同处理下表达量是不一样的。一样的,你的处理如果对目标基因mrna有影响,ct值又怎么会一样呢?

发自小木虫IOS客户端
3楼2020-07-15 20:27:46
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爆炒小木虫

新虫 (小有名气)



dongnong(金币+1): 谢谢参与
总量一致,内容物不一致,也就是潜在的模板不一样。所以通过ct值来反应表达量

发自小木虫Android客户端
4楼2020-07-15 23:26:15
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