24小时热门版块排行榜    

查看: 3641  |  回复: 8

dongnong

新虫 (初入文坛)


[交流] RNA浓度调整一致

将不同处理方式的样本RNA浓度调整一致,然后进行反转录和荧光定量PCR,不明白的是如果RNA的浓度调整一致,那Ct值应该也是相同的吧,那这样的话,浓度调整一致的意义是什么呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

学而时习

金虫 (小有名气)



dongnong(金币+1): 谢谢参与
浓度一致,表明对照样和处理样的样本数量是一样的,这样才有可比性,保证内参基因的CT值是一样的,但不同处理会影响目的基因的表达,导致CT值出现差异,然后根据公式计算相对表达量

发自小木虫Android客户端
2楼2020-07-15 20:23:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Italyhope

金虫 (正式写手)



dongnong(金币+1): 谢谢参与
将rna量调整成一样类似于western blot中你上样相同总量的蛋白,但是你感兴趣的蛋白在不同处理下表达量是不一样的。一样的,你的处理如果对目标基因mrna有影响,ct值又怎么会一样呢?

发自小木虫IOS客户端
3楼2020-07-15 20:27:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爆炒小木虫

新虫 (小有名气)



dongnong(金币+1): 谢谢参与
总量一致,内容物不一致,也就是潜在的模板不一样。所以通过ct值来反应表达量

发自小木虫Android客户端
4楼2020-07-15 23:26:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dongnong

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
4楼: Originally posted by 爆炒小木虫 at 2020-07-15 23:26:15
总量一致,内容物不一致,也就是潜在的模板不一样。所以通过ct值来反应表达量

RNA浓度相同,即总量一致,若Ct值是不相同的,那是不是可以理解为相同总量RNA的目的基因的拷贝数不一样。那这样的话,RNA总量一致,拷贝数不相同的情况是由于片段长度不一致吗?可是提取过程是一样的,怎么会导致片段长度不相同呢?刚刚接触这块,请多多指教
5楼2020-07-16 09:32:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dongnong

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
4楼: Originally posted by 爆炒小木虫 at 2020-07-15 23:26:15
总量一致,内容物不一致,也就是潜在的模板不一样。所以通过ct值来反应表达量

RNA浓度相同,即总量一致,若Ct值是不相同的,那是不是可以理解为相同总量RNA的目的基因的拷贝数不一样。那这样的话,RNA总量一致,拷贝数不相同的情况是由于片段长度不一致吗?可是提取过程是一样的,怎么会导致片段长度不相同呢?刚刚接触这块,请多多指教
6楼2020-07-16 09:34:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爆炒小木虫

新虫 (小有名气)


引用回帖:
6楼: Originally posted by dongnong at 2020-07-16 09:34:26
RNA浓度相同,即总量一致,若Ct值是不相同的,那是不是可以理解为相同总量RNA的目的基因的拷贝数不一样。那这样的话,RNA总量一致,拷贝数不相同的情况是由于片段长度不一致吗?可是提取过程是一样的,怎么会导致片 ...

影响转路水平的因素蛮多的,按照你的问题,你是指提取步骤导致的差异吗,只能说手法不一样,同一处理组的平行重复都不可能完全相同呀。

发自小木虫Android客户端
7楼2020-07-17 01:11:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赤玉子

金虫 (正式写手)



dongnong(金币+1): 谢谢参与
最好调整一致。用核酸检测仪,OD值判断的。一般80-100
9楼2020-07-20 11:38:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
2020-07-19 11:17   回复  
dongnong(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 dongnong 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +4 呼呼?~+123456 2026-03-06 4/200 2026-03-06 23:11 by L135790
[考研] 材料调剂 +8 ounce. 2026-03-04 9/450 2026-03-06 22:14 by 星空星月
[考研] 化学工程与技术316求调剂 +5 Sixuan wang 2026-03-06 5/250 2026-03-06 21:58 by 星空星月
[考研] 324求调剂 +5 wxz2 2026-03-03 8/400 2026-03-06 17:04 by 情长不过时光
[考研] 一志愿华中科技大学,化学专业344分,求调剂 +7 邢xing1 2026-03-02 7/350 2026-03-06 09:14 by guoweigw
[考研] 085602 293分求调剂 +3 SivanNano. 2026-03-05 3/150 2026-03-05 19:41 by caszguilin
[考研] 一志愿武理085601专硕347分求调剂 +4 啊欧欧欧 2026-03-04 5/250 2026-03-05 19:27 by Leding1356
[考研] 334求调剂 +3 Trying] 2026-03-03 4/200 2026-03-05 16:39 by zhukairuo
[考研] 283求调剂 +10 鹿沫笙 2026-03-02 11/550 2026-03-05 13:12 by ZHANGTDK
[考研] 320材料一志愿西工大专硕英二数二 有两年光伏工作经验 +5 锤某人 2026-03-04 8/400 2026-03-05 09:24 by oxidpl
[考研] 070300化学 280 一志愿太原理工 求调剂 +8 拾玖壹 2026-03-04 8/400 2026-03-05 08:52 by anny19840123
[考研] 调剂材料学硕 +6 词凝Y 2026-03-02 6/300 2026-03-05 07:10 by 昆工985
[考研] 0857求调剂 +4 CDDD1013 2026-03-04 4/200 2026-03-04 16:08 by zhukairuo
[考研] 能动297求调剂,本科川大 +4 邵11 2026-03-04 4/200 2026-03-04 15:29 by lylylyheart
[考研] 0703化学调剂 +4 G212 2026-03-03 5/250 2026-03-04 09:34 by 每天只摆一小会
[考研] 289求调剂 +8 yang婷 2026-03-02 10/500 2026-03-04 09:10 by 无际的草原
[考研] 【2026 硕士调剂】课题组 招收调剂生 +3 考研版棒棒 2026-03-02 5/250 2026-03-03 01:45 by kkky.
[考研] 0856调剂 +10 刘梦微 2026-02-28 10/500 2026-03-02 23:42 by hcy618
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +15 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 15/750 2026-03-02 20:13 by hypershenger
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
信息提示
请填处理意见