应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » RNA浓度调整一致
91/1返回列表
查看: 3585  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dongnong

新虫 (初入文坛)

[交流] RNA浓度调整一致

将不同处理方式的样本RNA浓度调整一致，然后进行反转录和荧光定量PCR，不明白的是如果RNA的浓度调整一致，那Ct值应该也是相同的吧，那这样的话，浓度调整一致的意义是什么呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2020-07-15 17:04:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

学而时习

金虫 (小有名气)
★
dongnong(金币+1): 谢谢参与
浓度一致，表明对照样和处理样的样本数量是一样的，这样才有可比性，保证内参基因的CT值是一样的，但不同处理会影响目的基因的表达，导致CT值出现差异，然后根据公式计算相对表达量

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2020-07-15 20:23:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Italyhope

金虫 (正式写手)
★
dongnong(金币+1): 谢谢参与
将rna量调整成一样类似于western blot中你上样相同总量的蛋白，但是你感兴趣的蛋白在不同处理下表达量是不一样的。一样的，你的处理如果对目标基因mrna有影响，ct值又怎么会一样呢？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2020-07-15 20:27:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爆炒小木虫

新虫 (小有名气)
★
dongnong(金币+1): 谢谢参与
总量一致，内容物不一致，也就是潜在的模板不一样。所以通过ct值来反应表达量

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2020-07-15 23:26:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dongnong

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 爆炒小木虫 at 2020-07-15 23:26:15
总量一致，内容物不一致，也就是潜在的模板不一样。所以通过ct值来反应表达量

RNA浓度相同，即总量一致，若Ct值是不相同的，那是不是可以理解为相同总量RNA的目的基因的拷贝数不一样。那这样的话，RNA总量一致，拷贝数不相同的情况是由于片段长度不一致吗？可是提取过程是一样的，怎么会导致片段长度不相同呢？刚刚接触这块，请多多指教
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2020-07-16 09:32:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dongnong

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 爆炒小木虫 at 2020-07-15 23:26:15
总量一致，内容物不一致，也就是潜在的模板不一样。所以通过ct值来反应表达量

RNA浓度相同，即总量一致，若Ct值是不相同的，那是不是可以理解为相同总量RNA的目的基因的拷贝数不一样。那这样的话，RNA总量一致，拷贝数不相同的情况是由于片段长度不一致吗？可是提取过程是一样的，怎么会导致片段长度不相同呢？刚刚接触这块，请多多指教
赞一下 回复此楼
6楼2020-07-16 09:34:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爆炒小木虫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dongnong at 2020-07-16 09:34:26
RNA浓度相同，即总量一致，若Ct值是不相同的，那是不是可以理解为相同总量RNA的目的基因的拷贝数不一样。那这样的话，RNA总量一致，拷贝数不相同的情况是由于片段长度不一致吗？可是提取过程是一样的，怎么会导致片 ...

影响转路水平的因素蛮多的，按照你的问题，你是指提取步骤导致的差异吗，只能说手法不一样，同一处理组的平行重复都不可能完全相同呀。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2020-07-17 01:11:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赤玉子

金虫 (正式写手)
★
dongnong(金币+1): 谢谢参与
最好调整一致。用核酸检测仪，OD值判断的。一般80-100
赞一下 回复此楼
9楼2020-07-20 11:38:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
mikeshen1018楼
2020-07-19 11:17   回复  
dongnong(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 dongnong 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭