[求助] QPCR的问题 已有1人参与

在做QPCR（sybr green）时一直没有扩增曲线（就是一条直线），图为溶解曲线的图和程序参数。 扩增片段为cgc att cag gat tgc atg att gcc tcg tct taa cgg tct caa ctc gta（此片段为设计合成） 上下游引物为ttc agg att gca tga ttg cc和acg agt tga gac cgt taa gac g 20μL体积，1μL模板（10μM），1μL（10μM）上游引物和1μL（10μM）下游引物，10μL supermix液，8μL的纯水。 所以在此向大神们请教几个问题：1，单链模板可以直接PCR？ 2，试剂盒supermix影响大？ 3，影响QPCR的关键点是啥？ 小白一枚，之前一直从事酶联免疫的分析检测，未涉及PCR实验，初接触，无处下手了！！！ 305889642721921794.jpg 790287839903650680.jpg

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