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油条vs豆浆

新虫 (小有名气)

[求助] 金纳米棒修饰DNA 已有1人参与

大家好,我最近尝试往金纳米棒上修饰巯基化DNA,利用的是低pH高盐法修饰,从紫外上能看到260有明显的DNA吸收峰,合成之后的产物也非常稳定,多次离心都能很好地收集到产物(应该不存在DNA脱落等因素);
但是在尝试结合互补链DNA的时候却一直都不能够成功(验证方式:1. 紫外看产物260吸收峰无明显变化;2.投入与修饰探针等量的互补链DNA,在结合后未发现上清中DNA含量变少),想请教下大家这是哪方面出问题了?
尝试过的影响因素:1、DNA在金纳米棒上的修饰比例;2、反应的温度、pH等
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supernatural

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引用回帖:
5楼: Originally posted by 油条vs豆浆 at 2020-06-17 10:27:06
谢谢建议,你的这种方法我也尝试过,但似乎DNA双链在低pH高盐环境下容易解链,没能成功把互补链留住;我后续再尝试下直接修饰吧,就是时间相对长一点。
另外,想和你探讨一下关于这个DNA链的空间位阻影响,这种位 ...

位阻主要是静电排斥和空间位阻,如果你后期还要加互补链,我觉得还是先杂交再偶联好些,只要设计的互补碱基超过10个,我感觉杂交后的双链没有那么容易解链。关于加spacer,已经加了spacer了,再加spacer感觉影响应该不是很大。
人生仿佛像一棵大树,需要风雨的洗礼才能茁壮成熟。
6楼2020-06-17 11:18:49
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supernatural

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【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
油条vs豆浆: 金币+20, ★★★很有帮助 2020-06-17 13:50:51
存在位阻,DNA不容易互补配对
你可以尝试先让DNA互补配对,再把双链DNA连接到金表面
人生仿佛像一棵大树,需要风雨的洗礼才能茁壮成熟。
2楼2020-06-12 17:24:03
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3楼2020-06-13 04:16:38
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4楼2020-06-13 04:16:56
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