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wjykycg

至尊木虫 (正式写手)

[交流] PCR产物扩增不出来,只有引物二聚体的位置有条带 已有9人参与

模板是反转录的cDNA,怀疑过模板的问题,换了几批不同细胞的cDNA还是不行。也怀疑过引物,重新合成过,也调整过序列重新合成,都不行。

关键是之前扩增出来过,但是后来就怎么也扩增不出来。难道是聚合酶或者Buffer出问题了?
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你设计一个内参基因作为阳性对照,确保你模板没问题,然后就是你的基因大小问题,如果基因太大,那就分段PCR克隆,1000bp以内都还好,酶的问题,可能性比较低,还有就是你试试把PCR产物作为模板进行二次PCR,你试试吧

发自小木虫Android客户端
7楼2020-06-20 01:35:39
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leejsmu

木虫 (小有名气)

年輕的心

ole
2楼2020-06-03 16:33:55
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HK驱魔者

铁虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用高保真酶试试吧

发自小木虫Android客户端
3楼2020-06-08 21:52:28
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qaz199018

金虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
换种酶,然后退火温度调低
~~~
4楼2020-06-12 21:00:16
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