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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助关于磷酸盐缓冲液的配制
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淬火大螃蟹

银虫 (小有名气)

[交流] 求助关于磷酸盐缓冲液的配制 已有3人参与

不是学生物的，想问一下文献中所说的配制PH为3.2、3.6、4.2、4.6、5.0的磷酸氢二钠、柠檬酸、氯化钾缓冲液，离子强度均为0.5M，没有说浓度，请问一般说的多少浓度的缓冲液，这个浓度是指什么呢？是不是一定要知道？
        还有就是，目前找的是只有磷酸氢二钠和柠檬酸的缓冲液配方如下：
         pH         0.2M Na2HPO4/ml         0.1M柠檬酸/ml
         3.2                4.94                            15.06
         3.6                6.44                            13.56
         4.2                8.28                            11.72
         4.6                9.35                            10.65
         5.0               10.30                            9.70
        没有说KCl的，请问KCl加进去是不是调节离子强度的？
        是不是说我可以按以上的配方，然后再加KCl调节离子强度？
        问题有点多，希望大侠们指导指导，万分感谢！感激不尽！感激涕零！
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1楼 2009-07-11 14:40:27
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aaaaaa1380

至尊木虫 (知名作家)
★ ★
淬火大螃蟹(金币+2,VIP+0):谢谢，我想知道的是我该怎么配这个缓冲液 7-13 13:15
钾盐是用来调节离子强度的，另外还可以用钠盐，原因如下：

磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na2HPO4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32
配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝3～4，
配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，
配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。
用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH 范围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH 变化小，如稀释10倍后pH 的变化小于0.1。
其缺点为：①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用.

希望楼主实验顺利
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3楼2009-07-11 23:04:37
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chenhch86

木虫 (小有名气)
★ ★
淬火大螃蟹(金币+2,VIP+0):配方上只说了两种溶液的配比，没说氯化钾的，请问我要加多少氯化钾啊？ 7-13 13:14
氯化钾是调节离子强度的。
其实你也可以把三溶液依上面都配好。用PH计调节。
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2楼2009-07-11 18:46:16
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xdz1978

至尊木虫 (文坛精英)

持之以恒！
★
淬火大螃蟹(金币+1,VIP+0): 7-13 13:15
引用回帖:
Originally posted by aaaaaa1380 at 2009-7-11 23:04:
钾盐是用来调节离子强度的，另外还可以用钠盐，原因如下：

磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝2.12， ...

楼主已经很详细了
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一身正气，两袖清风，三餐温饱，四大皆空！
4楼2009-07-12 08:48:58
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chenhch86

木虫 (小有名气)
请问楼主配多大浓度的？PH呢？
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5楼2009-07-13 19:34:13
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