| 查看: 2281 | 回复: 13 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
susizheng木虫 (著名写手)
我們是糖 甜到憂傷
|
[交流]
关于载体自连的问题 已有1人参与
|
||
|
在此和各位虫虫探讨一个问题。 相信各位虫虫也可能遇到过。 就是在构建测序载体或表达载体的时候总是遇到载体自连的问题，即筛选时出现很多假阳性。 当然一般的表达载体自连是因为载体双酶切回收的时候单个位点酶切的载体一并回收了，导致后期连接的时候自连。那么T载呢？没有相同的粘性末端却也出现了自连的情况。同学说T4 Ligase 具有聚合酶活性，是这样的吗？ 各位虫虫有何高见？ 另外有什么方法能够减少引物自连的问题呢？ 我一般连T，阳性克隆为80%左右，连pET28时有20%就很不错了，大多是自连。 [ Last edited by susizheng on 2009-7-10 at 17:24 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
电气专硕320求调剂
已经有5人回复
-
一志愿西北工业大学289 085602
已经有33人回复
-
一志愿哈工大 085600 277 12材科基求调剂
已经有24人回复
-
268分085602化学工程调剂
已经有28人回复
-
化学工程调剂289
已经有50人回复
-
求调剂，262机械专硕
已经有8人回复
-
305求调剂
已经有6人回复
-
327求调剂
已经有5人回复
-
347求调剂
已经有4人回复
-
272分材料子求调剂
已经有47人回复
w.king124 
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 1534.5
- 红花: 1
- 帖子: 601
- 在线: 284.4小时
- 虫号: 527924
- 注册: 2008-03-18
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
6楼2009-07-10 21:41:42
dyyyyy
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 19764.2
- 帖子: 1388
- 在线: 150.3小时
- 虫号: 315719
- 注册: 2007-03-03
- 性别: GG
- 专业: 林木遗传育种学
2楼2009-07-10 18:37:19
weilin2378
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 4737.1
- 散金: 3
- 帖子: 163
- 在线: 210.8小时
- 虫号: 792276
- 注册: 2009-06-11
- 性别: GG
- 专业: 生物地质学
3楼2009-07-10 20:34:50
4楼2009-07-10 20:48:33
