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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 载体构建
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1772701

新虫 (初入文坛)
已领完
载体构建
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我有一个400bp和882bp的片段需要构建过表达载体，但是现在基因一直扩不出来！！感觉要疯了，使用的是酶切位点?cds序列前后20bp的引物，现在梯度也试了，要么是没条带要么就是扩不出目的条带！用的日本晴种子cDNA，两个基因都在根和种子中表达，现在不想扩了根本不知道怎么办了！是我酶切位点找的有问题吗 都是直接网上搜的 引物是去掉了酶切位点后面的保护碱基?20bp 这么一个序列 F和R都是这个方法设计的。希望各位路过的大佬给点意见和建议！！！

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1楼2020-05-23 22:40:39
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等你的时候

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
基因扩不出，和酶切位点没有关系，应该从模板和扩增上找原因

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12楼2020-05-24 06:59:13
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