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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 角蛋白酶活测定方法
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森林7631

铜虫 (小有名气)

[交流] 角蛋白酶活测定方法 已有3人参与

感觉自己的方法不完善，希望找到一种更有效地方法，辛苦大家了

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-5 at 20:57 ]
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Time lost can not be recalled.
1楼 2009-07-08 10:58:22
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liu8bai6hong

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你好，请问你用的是哪个方法测的角蛋白酶酶活，我怎么感觉文献上报道的方法都重复不了呢
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2楼2011-04-14 21:22:52
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奔狼

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我用的keratin azure为底物，感觉测的也不好   不知道是需要怎么处理还是怎么搞   好烦躁
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3楼2014-11-11 17:04:31
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mangofay

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，角蛋白酶的酶活测定方法有很多种，看的文献中用的比较多的是参照普通蛋白酶的酶活测定方法，以酪蛋白为底物，在一定pH和温度下反应一定时间后，加入TCA中止反应，然后用福林酚试剂检测酪氨酸的含量。定义在该pH条件温度下每分钟产生1umol的酪氨酸的酶量为1U。也有用角蛋白溶液（百灵威）为底物，然后用福林酚试剂检测的。然后也有用角蛋白材料如羽毛粉、羊毛角蛋白为底物的。检测的无非也是水解液中的氨基酸含量（福林酚法测酪氨酸、测280nm下的吸光度测的也是含有苯环的氨基酸）、还有的检测可溶性蛋白的含量或者是多肽的含量。但是个人觉得角蛋白酶本身就是可溶性蛋白质，用TCA中止后水解蛋白酶有可能也被沉淀了，不用TCA中止，角蛋白酶本身又可能干扰。
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4楼2016-04-25 10:10:02
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