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角蛋白酶活测定方法 已有3人参与
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感觉自己的方法不完善，希望找到一种更有效地方法，辛苦大家了 [ Last edited by 350784478 on 2009-8-5 at 20:57 ] |
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| 你好，角蛋白酶的酶活测定方法有很多种，看的文献中用的比较多的是参照普通蛋白酶的酶活测定方法，以酪蛋白为底物，在一定pH和温度下反应一定时间后，加入TCA中止反应，然后用福林酚试剂检测酪氨酸的含量。定义在该pH条件温度下每分钟产生1umol的酪氨酸的酶量为1U。也有用角蛋白溶液（百灵威）为底物，然后用福林酚试剂检测的。然后也有用角蛋白材料如羽毛粉、羊毛角蛋白为底物的。检测的无非也是水解液中的氨基酸含量（福林酚法测酪氨酸、测280nm下的吸光度测的也是含有苯环的氨基酸）、还有的检测可溶性蛋白的含量或者是多肽的含量。但是个人觉得角蛋白酶本身就是可溶性蛋白质，用TCA中止后水解蛋白酶有可能也被沉淀了，不用TCA中止，角蛋白酶本身又可能干扰。 |
4楼2016-04-25 10:10:02
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