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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】霉菌的活化问题
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wxstongxue6161

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】霉菌的活化问题

1  我看了些文献，有的说霉菌的活化是在斜面上活化的，接种的时候直接向斜面上注入无菌水制成孢子悬液就行了，有的说在液体培养基中培养，然后接种，这两种方法用哪个好啊？
   2  好像制成孢子悬液的多一些，现在我想用液体培养基活化，但是在液体培养基活化的时候，就形成了菌丝球啊，接种的时候是只取液体的部分（我想取一定的体积到我的 麸皮 + 菜粕的发酵培养基中进行固态发酵），还是连同菌丝球一起接入？接菌丝球的时候，又不是很均匀，如果是液体培养后接种，大家是怎么处理的？
   很想结识生物方面的朋友，QQ：958273690

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-4 at 15:34 ]
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给自己一片悬崖,让自己无路可退.
1楼 2009-07-07 22:32:29
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lianght111

金虫 (小有名气)
★ ★
wxstongxue6161(金币+1,VIP+0): 7-7 22:56
wxstongxue6161(金币+1,VIP+0): 7-29 16:36
对真菌来讲制成孢子悬液应该更好些，做板的时候可以长得很均匀；如果用液体培养基摇床培养，多数就长成了比较结实的菌丝球，比较难处理。如果是液体的话建议打碎后再短时间培养，过滤后取菌液。孢子悬液有些也会形成一层孢子膜，也不会太好办。时间充足的话，建议两种方法都试试
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2楼2009-07-07 22:52:36
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wxstongxue6161

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by lianght111 at 2009-7-7 22:52:
对真菌来讲制成孢子悬液应该更好些，做板的时候可以长得很均匀；如果用液体培养基摇床培养，多数就长成了比较结实的菌丝球，比较难处理。如果是液体的话建议打碎后再短时间培养，过滤后取菌液。孢子悬液有些也会形 ...

液体打碎用什么打碎啊？是不是溶液染菌啊？我只取液体培养基中的液体部分，不管菌丝球？行不行啊？
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给自己一片悬崖,让自己无路可退.
3楼2009-07-07 23:00:23
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srlee

铁杆木虫 (小有名气)
★
wxstongxue6161(金币+1,VIP+0): 7-8 11:26
霉菌接种一般采用孢子悬液接种，比较方便和均匀，可以大量操作。利用液体培养的菌丝球接种，可以利用灭菌的研钵在无菌工作台将菌丝球研碎成匀浆再接种，操作繁琐，不利于大规模培养。一般认为孢子接种可能会存在孢子萌发的延滞期问题，延长发酵了时间！
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4楼2009-07-07 23:38:41
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wxstongxue6161

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by srlee at 2009-7-7 23:38:
霉菌接种一般采用孢子悬液接种，比较方便和均匀，可以大量操作。利用液体培养的菌丝球接种，可以利用灭菌的研钵在无菌工作台将菌丝球研碎成匀浆再接种，操作繁琐，不利于大规模培养。一般认为孢子接种可能会存在孢 ...

可是我觉得孢子悬液接种时，每次在斜面上刮下的孢子数目不一样，不同时间在不同的斜面上刮下的孢子浓度不一样（用同样体积的无菌水注入斜面），有时差别还是蛮大的，所以我想用液体培养基，消除些人为的影响因素

[ Last edited by wxstongxue6161 on 2009-7-8 at 11:31 ]
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给自己一片悬崖,让自己无路可退.
5楼2009-07-08 11:30:01
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candizhang

新虫 (初入文坛)
用血球计数板
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6楼2009-07-08 15:30:08
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随游

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by candizhang at 2009-7-8 15:30:
用血球计数板

同意LS。
用血球计数板将孢子数确定，再根据需要稀释成想要的孢子量，而且，如果技术够熟练了，相同的情况下，不同批次之间的孢子量不会差很大的。

菌球的破碎，玻璃珠就可以吧，将玻璃珠放入三角瓶中灭菌，在工作台操作就可以。

[ Last edited by 随游 on 2009-7-23 at 11:41 ]
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7楼2009-07-23 11:35:10
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srlee

铁杆木虫 (小有名气)
霉菌和放线菌培养为了不形成菌丝球，还可以在三角瓶中加入一根不锈钢的弹簧，效果还是比较好的，至于加入玻璃珠效果不明显！
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8楼2009-07-23 12:33:07
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dongjiqiao

铁杆木虫 (著名写手)
可以往液体培养基中加入表活剂吧，这样成球的几率会较小
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long,longlong.
9楼2009-07-23 13:28:35
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