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EDC/HoBt在水相中催化酰胺反应的诸多疑问！ 已有1人参与
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本人最近在做透明质酸（HA）的羧基与胱胺二盐酸盐（CYS）的氨基生成酰胺的反应。结果打核磁发现CYS并没有接上去。想请教一下各位大佬原因！ 1）反应溶剂。因为透明质酸只溶于水，通过参考文献，我选择了pH6.8的磷酸盐缓冲液作为反应溶剂。 2）催化体系。因为NHS水溶性不好，所以我用的是EDC.HCl和HoBt（HoBt是溶解到极少量的DMF中加入的）. 3）活化时间。我选择了搅拌活化2h后再加入CYS 咨询了一些师兄师姐，但是还是没搞明白，有几个问题要问： 1）pH的调节问题。因为EDC.HCl和CYS都带盐酸，所以加入之后反应体系的pH大概下降到5左右。 有必要通过加入NaOH把pH调回6.8吗？ 有人说EDC.HCl的最佳pH在4-6之间。但是，有人又说pH过酸会影响氨基部分的活性。 2）活化时间。 催化形成的活性酯在水溶液中是不是非常不稳定，所以我应该缩短活化时间到15min-30min吗？ 3）在查阅文献时发现有人用的EDC.HCl/sulfo-NHS，sulfo-NHS的水溶性比NHS要好些，但是跟HoBt相比，价格实在是有点过高了。 但是从机理上分析HoBt和sulfo-NHS的作用都是相同的。我有必要改用sulfo-NHS吗？ 马上就要研三了。疫情耽误了三个月的实验时间。现在材料合成不出来，整个人非常着急，求求有过经验的大家给出一些有用的意见！感激不尽！！@liuanan@liubin |
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