24小时热门版块排行榜    

查看: 941  |  回复: 19
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wenmingfu

木虫 (著名写手)

[交流] 很简单的实验就是做不出来

我在提取小桐子总DNA时候,出来的全是RNA,而且28s和18s超好,比我们实验室其他人用试剂盒提的RNA还好,但是我要的DNA一点都没有,郁闷死了,求各位指点指点。
我的方法是1)取约1g左右幼叶,在研钵中加液氮迅速研磨成粉末,转入10mll离心管中,加65度预热4.5ml提取液,摇匀。
2)水浴60min.每个20min摇一次。
3)加等体积氯仿:异戊醇(24:1)抽提液,摇匀至乳浊液。离心10min, 10000rpm,16℃
4)吸取上清,转入新的10ml离心管,按步骤3重复抽提一次;
5)吸取上清,转入新的10ml离心管,加入2倍体积的冰冻无水乙醇,慢慢摇匀,放在-20度冰箱30min
6)挑出沉淀,用75%酒精洗2次,每次10min.
7)无水乙醇洗一次,10min,
8)200ulTE溶解,检测
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我的方法是1)取约1g左右幼叶,在研钵中加液氮迅速研磨成粉末,转入10mll离心管中,加65度预热4.5ml提取液,摇匀。
2)水浴60min.每个20min摇一次。


水浴时加50uL 1 或 2 M 的NaOH 、Tris-Base母液,或者酚,
再试试看。

[ Last edited by HarveyWang on 2009-7-7 at 02:54 ]
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
9楼2009-07-07 02:41:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
水浴45min,室温离心试试
2楼2009-07-06 20:34:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zplipeng

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
怎么会这样呢?
是不是LZ操作不够温柔,把DNA都搞断了
加油哦↖(^ω^)↗,O(∩_∩)O哈哈~
3楼2009-07-06 21:25:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nancy20052008

木虫 (正式写手)

不要着急,慢慢来
会做好的
4楼2009-07-06 21:36:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
请填处理意见