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wenmingfu木虫 (著名写手)
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很简单的实验就是做不出来
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我在提取小桐子总DNA时候,出来的全是RNA,而且28s和18s超好,比我们实验室其他人用试剂盒提的RNA还好,但是我要的DNA一点都没有,郁闷死了,求各位指点指点。 我的方法是1)取约1g左右幼叶,在研钵中加液氮迅速研磨成粉末,转入10mll离心管中,加65度预热4.5ml提取液,摇匀。 2)水浴60min.每个20min摇一次。 3)加等体积氯仿:异戊醇(24:1)抽提液,摇匀至乳浊液。离心10min, 10000rpm,16℃ 4)吸取上清,转入新的10ml离心管,按步骤3重复抽提一次; 5)吸取上清,转入新的10ml离心管,加入2倍体积的冰冻无水乙醇,慢慢摇匀,放在-20度冰箱30min 6)挑出沉淀,用75%酒精洗2次,每次10min. 7)无水乙醇洗一次,10min, 8)200ulTE溶解,检测 |
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2楼2009-07-06 20:34:03
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