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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » ITS怎么测序？
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] ITS怎么测序？ 已有1人参与

第一次用PCR产物测ITS序列，都有杂峰。是不是等位基因的问题？求助做过ITS测序的木虫。
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1楼 2020-03-27 16:27:47
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zero406

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
jurkat.1640: 金币+1, ★有帮助 2020-03-29 17:32:02
是不是DNA不纯~PCR产物杂的~所有测出来杂峰
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2楼2020-03-29 11:25:22
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zero406 at 2020-03-29 11:25:22
是不是DNA不纯~PCR产物杂的~所有测出来杂峰

同样的DNA样品，测其它基因没问题
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3楼2020-03-29 17:31:40
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NAIVE.

新虫 (初入文坛)
PCR产物测序有杂峰很可能是引物的结合不够好，或者退火温度过低的原因。没问题的话可以将PCR产物纯化之后保存在ddH2O中，保存在Elution Buffer中对测序会有影响，导致出现问题。

发自小木虫IOS客户端
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4楼2020-03-31 23:13:40
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Emothy-stef

新虫 (小有名气)
不难,能扩增出来说明核酸序列应该不复杂,建议连接到T载体上用载体通用引物测序。

发自小木虫Android客户端
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5楼2020-04-05 23:04:33
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Emothy-stef at 2020-04-05 23:04:33
不难,能扩增出来说明核酸序列应该不复杂,建议连接到T载体上用载体通用引物测序。

确实得挑克隆测序
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6楼2021-07-07 09:51:15
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