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smallcat227木虫 (著名写手)
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求助:GFP标记枯草芽孢杆菌
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| 如题,穿梭载体是pUBC19,启动子是从标记菌株中筛选的,抗生素筛选用卡纳,每次构建的穿梭载体在大肠中都能良好表达,转入枯草后表达量就很低,蒙蒙亮(确定质粒已转入),无法满足进一步实验的需要(检测定殖),电转化转都不行,请教各位大侠失败的原因,是启动子不够强么(实验中用不同的启动子构建了多个穿梭载体都不行,每次大肠都很亮但转到枯草中就是不行),还是枯草的蛋白酶将GFP水解了?各位有什么建议?非常感谢! |
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