24小时热门版块排行榜    

查看: 895  |  回复: 9
当前主题已经存档。

fyn512045

新虫 (初入文坛)

[交流] 请求,PCR扩增条带一直不单一是什么原因?回收产物没有峰?

请求各位高手了,我的PCR扩增条带一直不单一,是什么原因啊?其回收后产物也没有峰?但是A260/280和浓度都是可以的,下一步该怎么办?请教各位了,谢谢!

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-11 at 14:27 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weilin2378

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能是引物特异性的问题,提高退火温度或做个梯度PCR试一试
2楼2009-07-03 11:14:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孔乙己

银虫 (正式写手)

估计要重新设计引物,特异性太差,没有峰可能是回收浓度太低了,建议冷冻抽干在溶解。


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
估计要重新设计引物,特异性太差,没有峰可能是回收浓度太低了,建议冷冻抽干在溶解。
愿大家共同进步
3楼2009-07-03 11:26:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可以用回收的产物作梯度稀释再P一次.
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2009-07-03 11:30:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beisimai895

木虫 (小有名气)

做个梯度PCR试试,如果不单一,肯定是特导性不强。
5楼2009-07-03 11:38:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

max_518


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可以提高退火温度或者做温度梯度看看条带是否单一
回收效率不好的话 可以换一种回收试剂盒试试
6楼2009-07-07 17:05:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

max_518

可以提高退火温度或做个温度梯度
回收效率不好可以换一种回收试剂盒试试
7楼2009-07-07 17:07:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

figo.339

木虫 (著名写手)

升高退火温度。
8楼2009-07-08 09:19:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jerryqpr

木虫 (正式写手)

小猪亲点的老公


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物特异性的问题,如果不是引物设计的问题的话,而是模版本身就很不容易p出特异条带,建议巢式pcr试试。
铁杵可以磨成针,木杵只能磨成牙签,有些事情不是努力可以改变的.
9楼2009-07-09 10:37:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mourning

木虫 (正式写手)

出现dimer时常见的事
10楼2009-07-09 10:39:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fyn512045 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 72/3600 2026-08-16 13:15 by 医学老男孩
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见