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fyn512045

新虫 (初入文坛)

[交流] 请求,PCR扩增条带一直不单一是什么原因?回收产物没有峰?

请求各位高手了,我的PCR扩增条带一直不单一,是什么原因啊?其回收后产物也没有峰?但是A260/280和浓度都是可以的,下一步该怎么办?请教各位了,谢谢!

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-11 at 14:27 ]
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max_518

可以提高退火温度或做个温度梯度
回收效率不好可以换一种回收试剂盒试试
7楼2009-07-07 17:07:41
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weilin2378

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能是引物特异性的问题,提高退火温度或做个梯度PCR试一试
2楼2009-07-03 11:14:15
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孔乙己

银虫 (正式写手)

估计要重新设计引物,特异性太差,没有峰可能是回收浓度太低了,建议冷冻抽干在溶解。


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
估计要重新设计引物,特异性太差,没有峰可能是回收浓度太低了,建议冷冻抽干在溶解。
愿大家共同进步
3楼2009-07-03 11:26:56
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可以用回收的产物作梯度稀释再P一次.
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2009-07-03 11:30:03
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