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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请求，PCR扩增条带一直不单一是什么原因？回收产物没有峰？
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fyn512045

新虫 (初入文坛)

[交流] 请求，PCR扩增条带一直不单一是什么原因？回收产物没有峰？

请求各位高手了，我的PCR扩增条带一直不单一，是什么原因啊？其回收后产物也没有峰？但是A260/280和浓度都是可以的，下一步该怎么办？请教各位了，谢谢！

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-11 at 14:27 ]
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1楼 2009-07-03 11:05:09
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jerryqpr

木虫 (正式写手)

小猪亲点的老公
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引物特异性的问题，如果不是引物设计的问题的话，而是模版本身就很不容易p出特异条带，建议巢式pcr试试。
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铁杵可以磨成针,木杵只能磨成牙签,有些事情不是努力可以改变的.
9楼2009-07-09 10:37:58
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weilin2378

木虫 (小有名气)
★
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可能是引物特异性的问题，提高退火温度或做个梯度PCR试一试
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2楼2009-07-03 11:14:15
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孔乙己

银虫 (正式写手)

估计要重新设计引物，特异性太差，没有峰可能是回收浓度太低了，建议冷冻抽干在溶解。

★
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估计要重新设计引物，特异性太差，没有峰可能是回收浓度太低了，建议冷冻抽干在溶解。
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愿大家共同进步
3楼2009-07-03 11:26:56
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以用回收的产物作梯度稀释再P一次.
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2009-07-03 11:30:03
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