| 查看: 872 | 回复: 3 | |||
1437521148新虫 (初入文坛)
|
[交流]
蛋白纯化 已有2人参与
|
|
请问 有没有人知道 蛋白标准品如何去摸索纯化条件呢?如果用标准品去过柱子 接收到的液体用什么方法确定哪个点的洗脱效果是最好的呢 发自小木虫Android客户端 |
» 猜你喜欢
存款400万可以在学校里躺平吗
已经有5人回复
拟解决的关键科学问题还要不要写
已经有5人回复
基金委咋了?2026年的指南还没有出来?
已经有9人回复
基金申报
已经有5人回复
国自然申请面上模板最新2026版出了吗?
已经有17人回复
纳米粒子粒径的测量
已经有8人回复
疑惑?
已经有5人回复
计算机、0854电子信息(085401-058412)调剂
已经有5人回复
Materials Today Chemistry审稿周期
已经有5人回复
溴的反应液脱色
已经有7人回复
2楼2020-03-12 13:53:33
ECUST_CAPF
铜虫 (小有名气)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 587.8
- 帖子: 241
- 在线: 27.4小时
- 虫号: 21351119
- 注册: 2020-03-04
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
|
纠正一个问题,蛋白标准品就是些分子量大小已知的蛋白混合物,简单说就是用来标定对应的柱子的,换句话说就是标定分子量多少的蛋白应该在什么位置出峰,因为柱子使用久了,柱效会发生一定的变化,如蛋白A用新柱子是在20ml出峰,但是时间久了之后,可能就会在30ml出峰,这时候你就无法从出峰位置直观判定该蛋白是否正确了,需要跑胶看一下。 纯化条件的话建议你去GE官网上下载gel filtration的handbook,里面有推荐的buffer,一般就是50mM磷酸盐缓冲液,加上低盐 150mM 以下的NaCl,pH7.2 , 但是具体的盐浓度和pH要根据目的蛋白进行调整 |

3楼2020-03-13 14:08:37
ECUST_CAPF
铜虫 (小有名气)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 587.8
- 帖子: 241
- 在线: 27.4小时
- 虫号: 21351119
- 注册: 2020-03-04
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能

4楼2020-03-13 14:11:26











回复此楼