24小时热门版块排行榜    

查看: 629  |  回复: 9
当前主题已经存档。

stfo

铜虫 (小有名气)

[交流] 求教pET28a的插入序列

我想用EcoRI(上游)和Hind III(下游)这两个位点,请问还用在上游引物前补碱基吗?
我数了一下,好像正好是3的整数倍

请高人赐教
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引入酶切位点后需要加保护碱基
2楼2009-06-23 11:54:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛~

保护碱基是为了让酶更好的识别酶切位点,所以一般引物都得加保护碱基。
平和悦衲!
3楼2009-06-23 12:13:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongqing

金虫 (小有名气)

microbiology


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
需要加保护碱基,否则会影响酶切效果!
4楼2009-06-23 12:13:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thaw

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不用加,连载体测序后切下来连
不过如果你想直接PCR切的话就要加保护碱基了,要注意点HindIII不好玩
5楼2009-06-23 12:18:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stfo

铜虫 (小有名气)

酶切的时候肯定是要加保护碱基的

我是想问用这个两个酶切位点的话,在pET28a中,阅读框会不会错位


再次谢谢
6楼2009-06-23 13:35:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛~

阅读框不会出错
平和悦衲!
7楼2009-06-23 13:39:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thaw

铜虫 (小有名气)

不会出错
8楼2009-06-23 16:03:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

馋猫

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
a就是正常阅读框的,b,c都是为移码设计的
9楼2009-06-23 17:10:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stfo

铜虫 (小有名气)

谢谢各位
10楼2009-06-23 19:51:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 stfo 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 316求调剂 +8 梁茜雯 2026-03-19 8/400 2026-03-25 20:33 by 热情沙漠
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 07化学303求调剂 +4 睿08 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:15 by qingfeng258
[考研] 26考研-291分-厦门大学(085601)-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 求调剂 +6 研研,接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工 264分各科过A区国家线 +3 哈哈157349 2026-03-21 3/150 2026-03-24 14:11 by zhyzzh
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见