24小时热门版块排行榜    

查看: 628  |  回复: 9
当前主题已经存档。

stfo

铜虫 (小有名气)

[交流] 求教pET28a的插入序列

我想用EcoRI(上游)和Hind III(下游)这两个位点,请问还用在上游引物前补碱基吗?
我数了一下,好像正好是3的整数倍

请高人赐教
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引入酶切位点后需要加保护碱基
2楼2009-06-23 11:54:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛~

保护碱基是为了让酶更好的识别酶切位点,所以一般引物都得加保护碱基。
平和悦衲!
3楼2009-06-23 12:13:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongqing

金虫 (小有名气)

microbiology


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
需要加保护碱基,否则会影响酶切效果!
4楼2009-06-23 12:13:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thaw

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不用加,连载体测序后切下来连
不过如果你想直接PCR切的话就要加保护碱基了,要注意点HindIII不好玩
5楼2009-06-23 12:18:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stfo

铜虫 (小有名气)

酶切的时候肯定是要加保护碱基的

我是想问用这个两个酶切位点的话,在pET28a中,阅读框会不会错位


再次谢谢
6楼2009-06-23 13:35:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛~

阅读框不会出错
平和悦衲!
7楼2009-06-23 13:39:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thaw

铜虫 (小有名气)

不会出错
8楼2009-06-23 16:03:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

馋猫

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
a就是正常阅读框的,b,c都是为移码设计的
9楼2009-06-23 17:10:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stfo

铜虫 (小有名气)

谢谢各位
10楼2009-06-23 19:51:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 stfo 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 316求调剂 +8 梁茜雯 2026-03-19 8/400 2026-03-25 20:33 by 热情沙漠
[考研] 274求调剂 +8 顾九笙要谦虚 2026-03-24 12/600 2026-03-25 20:15 by 20021109
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] 081700 调剂 267分 +10 迷人的哈哈 2026-03-23 10/500 2026-03-25 12:12 by userper
[考研] 299求调剂 +7 shxchem 2026-03-20 9/450 2026-03-25 10:41 by lbsjt
[考研] 0854 考研调剂 招生了!AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 材料292调剂 +8 橘颂思美人 2026-03-23 8/400 2026-03-24 16:33 by laoshidan
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料,材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
信息提示
请填处理意见