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xuox

木虫 (正式写手)

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[交流] 在线急助：如何解决琼脂糖珠的吸附问题

实验中使用琼脂糖珠作为固相载体来筛选药物小分子，但是小分子基本上90%都被吸附在琼脂糖珠上面了，请问各位虫友有什么方法可以钝化琼脂糖珠把这种吸附作用的不利影响降低到最小？注：实验体系需要需要酸性条件 ph为5左右~~~补充一下，简单地说就是用琼脂糖珠修饰生物靶分子筛选黄酮类的小分子，在做空白的时候发现在没有固定生物靶分子的糖珠在加入黄酮前后，90%的小分子都被吸附在糖珠上面了没法被分析，我就是想找一种方法把糖珠钝化一下使比较少的黄酮被吸附啊~~

[ Last edited by xuox on 2009-6-23 at 13:46 ]

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1楼 2009-06-23 09:51:15

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xuox

木虫 (正式写手)

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恩，有道理，不过现在的一个问题就是关于糖珠分离小分子和大分子的时候，一般书上说的原理都是小分子进入网孔大分子进不去随着流动相而流出，这里涉及的问题就是在统计的层面上来说网孔的大小是比较小只能让小分子进去，还有一个问题就是对于网孔的空间到底可以容纳多少分子？我没查到这个数据，不过粗略地换位考虑的话在小分子过量很多的情况下，小分子可以将网孔填完，当然这个应该是处于一种动态的平衡之中，当加入黄酮之后，至少将有很多的黄酮保留在溶液中，可以这样理解吗？不过可以试一下啊，毕竟这个很容易就实现了，还有就是刚在网上查的对于象用牛血清白蛋白还有三乙醇胺来封闭糖珠，这个封闭的原理是不是只和糖珠上面的一些活性位点作用但对于小分子进入网孔的过程影响很少呢？