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xuox

木虫 (正式写手)


[交流] 在线急助:如何解决琼脂糖珠的吸附问题

实验中使用琼脂糖珠作为固相载体来筛选药物小分子,但是小分子基本上90%都被吸附在琼脂糖珠上面了,请问各位虫友有什么方法可以钝化琼脂糖珠把这种吸附作用的不利影响降低到最小?注:实验体系需要需要酸性条件 ph为5左右~~~补充一下,简单地说就是用琼脂糖珠修饰生物靶分子筛选黄酮类的小分子,在做空白的时候发现在没有固定生物靶分子的糖珠在加入黄酮前后,90%的小分子都被吸附在糖珠上面了没法被分析,我就是想找一种方法把糖珠钝化一下使比较少的黄酮被吸附啊~~

[ Last edited by xuox on 2009-6-23 at 13:46 ]
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abcfangli

金虫 (小有名气)

你要把你的情况说清楚,别人才能帮你
4楼2009-06-23 13:17:50
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★
xuox(金币+1,VIP+0):黄酮类的,极性中等吧,用的是标准品, 6-23 13:50
一点也不具体。

你的小分子是什么一类的化合物?

带电性很强吗?

有机溶剂提取的还是水提的啊?!

不说清楚,没人可以准确回答!
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2009-06-23 12:42:09
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

估计不是吸附,是被困在琼脂糖的小网孔里了。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2009-06-23 12:43:34
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★ ★
xuox(金币+2,VIP+0):我是在ep管里做的,不是过柱子,装柱子的话岂不是用量很大?我用的这种珠子 5ml就三千多,有没有什么方法可以封闭这些小网孔啊? 6-23 20:07
你是在柱子上做的吗?
如果是在烧杯里,这些小分子会被困在琼脂糖的小网孔内,表面上看是被其吸附了。

建议你将珠子装柱子,空白一根,有生物靶分子的一根,用测试样品上柱后,用相关缓冲液20个体积以上冲洗。

缓冲液的选择跟你的小分子与生物靶分子的相互作用类型相关,需要自己设计有针对性的洗脱溶液。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2009-06-23 17:03:57
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