| 查看: 2746 | 回复: 13 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
yedansky新虫 (著名写手)
|
[交流]
蛋白可溶性表达 无活性
|
||
|
有没有可能 大肠杆菌在OD600 0.4-0.6 诱导时，少量表达的可溶性蛋白 有很高的活性 但OD600 值在0.7-0.8或者更高，虽然为可溶性表达，但是无活性，有人有这种情况么 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有91人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
yedansky
新虫 (著名写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 4412.5
- 散金: 522
- 红花: 2
- 帖子: 1131
- 在线: 57.1小时
- 虫号: 6831978
- 注册: 2017-06-23
- 专业: 药物、基因载体系统
9楼2020-01-17 09:09:53
旭日读书
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 13085.5
- 散金: 285
- 红花: 4
- 沙发: 1
- 帖子: 2392
- 在线: 674小时
- 虫号: 3998838
- 注册: 2015-07-31
- 专业: 环境微生物学
2楼2020-01-10 16:01:09
zsygxh
金虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1110.3
- 散金: 11
- 红花: 2
- 帖子: 105
- 在线: 56.5小时
- 虫号: 2821684
- 注册: 2013-11-23
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+5, 鼓励热心回帖交流 2020-01-18 20:28:23
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+5, 鼓励热心回帖交流 2020-01-18 20:28:23
|
关系应该不大。 1. 首先蛋白可溶并不代表蛋白处于天然结构，它可以是可溶性多聚体，也可以是多种结构的混合物，虽然没有沉淀，但有可能活性位点被包埋或活性位点的氨基酸侧链空间位置变化而没有活性，这跟蛋白性质有关，所以即使可溶活性也可能很低甚至无活性。 2. 蛋白可能存在必要的修饰才有活性，原核表达系统无法完成，查文献自行确认。 3. 缺乏辅因子，查文献自行确认。 建议纯化以后跑一下HPLC，先确认样品是否为单一结构。另外，确认一下序列里有没有cys，如果有确认cys是形成二硫键还是参与金属离子配位的，如果没有尝试融合不同标签表达。 总之，优先尝试通过可溶表达获得天然构象的蛋白，不行尝试复性。 |
3楼2020-01-10 17:09:02
匿名
用户注销 (职业作家)
- 应助: 42 (小学生)
- 金币: 2533.7
- 散金: 1030
- 红花: 44
- 沙发: 7
- 帖子: 4028
- 在线: 1192.9小时
- 虫号: 0
- 注册: 2013-07-13
- 性别: MM
- 专业: 系统生物学
4楼2020-01-10 19:41:40
