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guoxingjun2008

金虫 (正式写手)

[交流] PCR有目的条带,但是比较弱?

今天刚跑完PCR,电泳后发现有目的条带,但是比Marker的带弱多了,没有Marker亮,以前做过,同样加3ul的量,条带应该亮度差不多,但是不知道为什么这次目的条带比较弱呀?

我把图粘贴上来了,在附件中,最左边的是Marker2000,然后依次左右都是样品孔,其中有三个孔几乎什么都没有,其他孔都还有,但是比较弱,大家帮我看看问题有可能出现在什么地方,谢谢!

[ Last edited by guoxingjun2008 on 2009-6-19 at 11:54 ]
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gastrodia

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我昨天做目的cDNA的RTPCR,结果做了两次,电泳3微升都没看出来,我又把PCR管放到PCR仪上,继续跑了15个循环,再电泳,出来了还挺亮,呵呵
8楼2009-06-17 20:39:02
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

可能酶的活力降低了
2楼2009-06-17 18:01:53
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

或者模板量少了等原因
3楼2009-06-17 18:02:27
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

没有非特异性扩增的话,可以多P几轮试试
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2009-06-17 18:17:49
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