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zhyyk10

金虫 (小有名气)

[交流] 各位见过这样的PCR扩增现象吗?

各位虫虫帮忙看看哈!现在真的是没办法了,刚开始,看到阴性对照有一条500bp左右的条带,我认为我的试剂有污染,所以一一换新的试剂连模板和引物也是新的,结果还出现这样的现象,marker是5000bp的,目的条带是1.7kb的,泳道2,3,4,5是四管相同模板的扩增条带。
请大家帮帮我看看吧?我真的不知道是怎么了?

[ Last edited by amisking on 2009-6-12 at 11:51 ]
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相信自己!
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的耗材有没有高压过?
另外,loading buffer也换吧……
2楼2009-06-12 11:27:47
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smurfen

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
PCR的特异性不好吧
不过4管相同的条件结果不一样挺奇怪的呢
操作的平行性不好?
Advances in Prevention of Thermal Runaway in Lithium-Ion Batteries
3楼2009-06-12 11:30:12
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zhyyk10

金虫 (小有名气)

耗材全是高压灭菌了的
相信自己!
4楼2009-06-12 11:39:19
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zhyyk10

金虫 (小有名气)

这个引物特异性,怎么说呢?我用Taq扩的就只有一条条带的,这个图是用PFU和GC buffer扩的
相信自己!
5楼2009-06-12 11:41:02
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zhyyk10

金虫 (小有名气)

loading buffer也换了的
相信自己!
6楼2009-06-12 11:42:36
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主

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如果没有人帮助你,那么你就去帮助别人。
7楼2009-06-12 12:04:35
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很奇怪,引物的问题吗》
8楼2009-06-12 13:33:39
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zhyyk10

金虫 (小有名气)

不清楚啊!如果是引物的问题,阴性对照怎么解释呢?
相信自己!
9楼2009-06-12 14:56:12
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w.king124

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
全换吧,找原因太浪费时间了
10楼2009-06-12 15:00:56
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